Título
Análisis del efecto de toxinas de Anthopleura elegantisima, Conus californicus y Auronoctonus phaiodactylus en Mycobacterium tuberculosis
Analysis of the effect of whole venom and toxins fractions from Anthopleura elegantisima, Conus californicus and Auronoctonus phaiodactylus against Mycobacerium tuberculosis
Autor
DANIELA ALEJANDRA MUNRO ROJAS
Colaborador
Alexei Fedorovish Licea Navarro (Asesor de tesis)
Nivel de Acceso
Acceso Abierto
Materias
Resumen o descripción
El incremento de Tuberculosis en personas inmuno deprimidas y el surgimiento de cepas multidrogo-resistentes en todo el mundo, ha originado la búsqueda de nuevos medicamentos contra Mycobacterium tuberculosis. El tratamiento contra Tuberculosis consiste de una terapia administrada por largos periodos, los cuales en su mayoría son agresivos y como consecuencia provocan efectos secundarios. Al menos el 2 % de la tuberculosis es causada por cepas de Mycobacterium tuberculosis multidrogo-resistente (MDR-TB) cuya tasa de recuperación o cura de los pacientes es menos del 60%. En los últimos años, la búsqueda de péptidos y toxinas a partir de organismos o productos de origen natural para combatir este problema es uno de los objetivos para el descubrimiento de nuevos fármacos que ataquen microorganismos resistentes a antibióticos. En este campo, ciertos grupos taxonómicos han desarrollado estrategias de origen químico para interactuar con otros organismos en su ambiente ya sea como defensa o para depredación. Los agentes usados por estos organismos constituyen una gran variedad de moléculas con características bioquímicas diferentes especializadas para cada grupo, muchas de ellas son de origen peptídico dirigidos receptores y canales iónicos. En esta investigación, se realizó el análisis del extracto crudo y fracciones obtenidas del veneno de Auronoctonus phaiodactylus (Alacrán), Anthopleura elegantisima (Anémona) y Conus californicus (Conus) en la cepa H37Rv de Mycobacterium tuberculosis. Las concentraciones mínimas inhibitorias (MCIs) fueron determinadas por los métodos colorimétricos MTT [3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)- difenil bromide of tetrazolium] y Azul Alamar (AA). Se encontró actividad antifímica del extracto crudo anémona, con una CMI (concentración mínima inhibitoria) de 40 mg/ml, del extracto crudo de Conus a 20 mg/ml y 7.5 mg/ml, dependiendo del método empleado; con la fracción I de anémona por cromatografía de exclusión molecular (SEC), y la fracción II de conus por HPLC ambas con una CMI de 400 µg/ml. También fue posible detectar actividad en la fracción por HPLC (cromatografía líquida de alta presion) de 15 a 20 minutos a partir de la Fracción I de anémona por SEC, a una CMI de 1.45 µg/ml. Para el caso del veneno de alacrán no se detectó actividad antifímica. Además, se realizó un análisis por PCR (Reacción en Cadena de la Polimerasa) y por RFLPs (Polimorfismo en la Longitud de Fragmentos de Restricción), para la identificación de especies y un...
The increasing incidence of tuberculosis in immuno-compromised persons and the emergence of multidrug-resistant strain over world have highlighted the importance of screening effective novel drugs against Mycobacterium tuberculosis. The treatment of TB requires a multidrug regimen administrated over a long period of time, and a high level of compliance with therapy. At least 2% of tuberculosis is caused by multidrug-resistant Mycobacterium tuberculosis (MDR-TB) and the cure rate of MDR-TB is reduced to less than 60. The screening of peptides and toxins from organism or natural products to struggle this problem in the last years is a great hit to discover novel drugs against microorganism resistant. In this field certain taxonomic groups have developed special chemical strategies for the interaction with other organisms in their environment. Conus californicus, Auronoctonus phaiodactylus and Anthopleura elegantisima are predators, they produce venoms with a remarkable diversity of pharmacologically active peptides, their targets are ion channels and receptors, and some others components having activity and specify. In this study, the activities of crude venom and fractions isolates from the venom apparatus of Conus californicus (Conus), the venom of Auronoctonus phaiodactylus (scorpion) and the extraction with ethanol 30% of Anthopleura elegantisima (Anemone) were investigated against strain H37RV of Mycobacterium tuberculosis. Minimum inhibitory concentrations (MCIs) were determined by colorimetric method MTT (3-(4,5)- dimetiltiazol-2-il)- difenil bromide of tetrazolium) and Blue Alamar. It was found activities from the crude extract of anemone with MIC (Minimum Inhibitory Concentration) of 40 mg/ml, the crude extract of conus with 20 mg/ml and 7.5 mg/ml depending the method employed, and with the fraction I of anemone by SEC (Size Exclusion Chromatography) and the fraction II of conus by HPLC with a MIC of 400 µg/ml. We also found an activity in the fraction from 15 to 20 minutes obtained by HPLC (High pressure liquid chromatography) from the fraction I by SEC with a MIC 1.45 µg/ml, but we did not find any activity with the venom of the scorpion. Besides it was carried an analysis by PCR (Polymerase Chain Reaction) and RFLPs (Restriction Fragment Length Polymorphism) of 96 clinical isolates for identification of species and epidemiologic date base of the Hospital General of Tijuana B.C. México.
Editor
CICESE
Fecha de publicación
2005
Tipo de publicación
Tesis de maestría
Recurso de información
Formato
application/pdf
Idioma
Español
Sugerencia de citación
Munro Rojas, D.A. 2005. Análisis del efecto de toxinas de Anthopleura elegantisima, Conus californicus y Auronoctonus phaiodactylus en Mycobacterium tuberculosis. Tesis de Maestría en Ciencias. Centro de Investigación Científica y de Educación Superior de Ensenada. 101 pp.
Repositorio Orígen
Repositorio Institucional CICESE
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