Título
Análisis ultraestructural de la pared celular de cepas mutantes de cdc-24 en el hongo filamentoso Neurospora crassa
Ultrastructural analysis of the cell Wall of mutants strains of cdc-24 in the filamentous fungus Neurospora crassa
Autor
Sergio David Moreno Velásquez
Colaborador
Ernestina Castro Longoria (Asesor de tesis)
Nivel de Acceso
Acceso Abierto
Materias
Resumen o descripción
Durante el establecimiento y mantenimiento del crecimiento polarizado en hongos filamentosos se acumulan y coordinan múltiples complejos proteicos en la zona apical, esto con la finalidad de asegurar que los componentes celulares se incorporen a la membrana plasmática y así biosintetizar nueva pared celular. En el hongo filamentoso Neurospora crassa, el factor de intercambio de nucleótido de guanina (GEF) CDC-24, es esencial para el establecimiento y mantenimiento de la polaridad celular. Se ha reportado que la cepa mutante Δcdc-24 es letal y que mutantes condicionantes a temperatura muestran un crecimiento anormal con hifas muy afectadas en su morfología. Sin embargo, no existen estudios a nivel ultraestructural del arreglo intracelular de dichas mutantes. En el presente trabajo se determinó que las tres cepas mutantes de cdc-24 (24-21, 10-19 y 19-3) de N. crassa, presentan grandes afecciones a nivel intracelular. Los análisis fenotípicos de las colonias correspondientes a las tres mutantes, mostraron un crecimiento lento, con aumento en el índice de ramificación, menor índice de conidiación y baja producción de biomasa. Mediante microscopía electrónica de transmisión (TEM), se determinó un arreglo intracelular atípico con numerosos núcleos, mitocondrias y septos en la zona apical de las hifas y un aumento en el grosor de la pared celular, con más de 290 nm de espesor en las tres mutantes. Así mismo, mediante un análisis químico se determinó un aumento en la concentración de quitina para las tres cepas mutantes en comparación con la cepa silvestre. Estos resultados demuestran que una alteración en el producto génico de cdc-24 afecta considerablemente su función y por lo tanto se altera la cascada de señalización que da lugar a un crecimiento polarizado normal y que por lo tanto se afectan procesos tales como el crecimiento, morfogénesis, distribución de organelos y biosíntesis de la pared celular entre otros.
During the establishment and maintenance of polarized growth in filamentous fungi, multiple protein complexes accumulate and coordinate in the apical zone in order to ensure that the cell components are incorporated into the plasma membrane and new cell wall is synthesized. In the filamentous fungus Neurospora crassa, the guanine nucleotide exchange factor (GEF) CDC-24, is essential for the establishment and maintenance of cell polarity. It has been reported that the mutant strain Δcdc-24 is lethal and the analysis of temperature-conditional mutants show an abnormal hyphal growth and are greatly affected in their morphology. However, there are no ultrastructural studies about the intracellular organization of these mutants. In this study it was determined that the three conditional mutant strains of N. crassa; cdc-24 (24-21, 10-19 and 19-3) are greatly affected, showing intracellular changes. The phenotypic analysis of the three mutants showed colonies with very slow growth, with increased branching index, lower rate of conidiation and low biomass production. Transmission electron microscopy (TEM) revealed atypical intracellular arrangement with a large amount of nuclei, mitochondria and septa in the apical zone of the hyphae, also an increase in cell wall thickness, with more than 290 nm width. Likewise, it was determined by chemical analysis an increase in the concentration of chitin for the three mutant strains compared to the wild type strain. These results demonstrate that an alteration in the product of cdc-24 significantly affects its function and therefore disrupts the signaling cascade that leads to a normal polarized growth and therefore affect processes such as growth, morphogenesis, and organelle distribution as well as cell wall biosynthesis among others.
Editor
CICESE
Fecha de publicación
2012
Tipo de publicación
Tesis de maestría
Recurso de información
Formato
application/pdf
Idioma
Español
Sugerencia de citación
Moreno Velásquez, Sergio David.2012.Análisis ultraestructural de la pared celular de cepas mutantes de cdc-24 en el hongo filamentoso Neurospora crassa.Tesis de Maestría en Ciencias. Centro de Investigación Científica y de Educación Superior de Ensenada, Baja California.
Repositorio Orígen
Repositorio Institucional CICESE
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