Título

The PQQ-alcohol dehydrogenase of Gluconacetobacter diazotrophicus.

Autor

SAUL GOMEZ MANZO

MARTHA LUCINDA CONTRERAS ZENTELLA

ALEJANDRA ABIGAIL GONZALEZ VALDEZ

MARTHA ELENA SOSA TORRES

ROBERTO ALEJANDRO ARREGUIN ESPINOSA DE LOS MONTEROS

JOSE EDGARDO ESCAMILLA MARVAN

Nivel de Acceso

Acceso Abierto

Resumen o descripción

La oxidación del etanol en ácido acético es el proceso más característico en las bacterias del ácido acético. Gluconacetobacter diazotrophicus es bastante único entre las bacterias del ácido acético, ya que lleva a cabo la fijación de nitrógeno y es un verdadero endofito, originalmente aislado de la caña de azúcar. Aparte de su peculiar estilo de vida, Ga. Diazotrophicus, posee un sistema constitutivo de la oxidasa ligada a la membrana para etanol. El complejo de alcohol deshidrogenasa (ADH) de Ga. Diazotrophicus se purificó hasta homogeneidad a partir de la fracción de membrana. Exponía dos subunidades con masas moleculares de 71,4 kDa y 43,5 kDa. Una reacción positiva a la peroxidasa confirmó la presencia de citocromo c en ambas subunidades. La pirroloquinolina quinona (PQQ) de ADH se identificó mediante luz UV-visible y espectroscopia de fluorescencia. La enzima se purificó en su estado completo reducido; El ferricianuro de potasio indujo su oxidación. El etanol o el acetaldehído restauraron el estado reducido completo. La enzima mostró un punto isoeléctrico (pI) de 6,1 y su pH óptimo fue de 6,0. Tanto el etanol como el acetaldehído se oxidaron casi a la misma velocidad, lo que sugiere que el complejo ADH de Ga. Diazotrophicus podría ser cinéticamente competente para catalizar, al menos in vitro, la doble oxidación de etanol en ácido acético.

The oxidation of ethanol to acetic acid is the most characteristic process in acetic acid bacteria. Gluconacetobacter diazotrophicus is rather unique among the acetic acid bacteria as it carries out nitrogen fixation and is a true endophyte, originally isolated from sugar cane. Aside its peculiar life style, Ga. diazotrophicus, possesses a constitutive membrane-bound oxidase system for ethanol. The Alcohol dehydrogenase complex (ADH) of Ga. diazotrophicus was purified to homogeneity from the membrane fraction. It-exhibited two subunits with molecular masses of 71.4 kDa and 43.5 kDa. A positive peroxidase reaction confirmed the presence of cytochrome c in both subunits. Pyrroloquinoline quinone (PQQ) of ADH was identified by UV-visible light and fluorescence spectroscopy. The enzyme was purified in its full reduced state; potassium ferricyanide induced its oxidation. Ethanol or acetaldehyde restored the full reduced state. The enzyme showed an isoelectric point (pI) of 6.1 and its optimal pH was 6.0. Both ethanol and acetaldehyde were oxidized at almost the same rate, thus suggesting that the ADH complex of Ga. diazotrophicus could be kinetically competent to catalyze, at least in vitro, the double oxidation of ethanol to acetic acid.

Editor

the International Committee on Food Microbiology and Hygiene (ICFMH) of the IUMS

Fecha de publicación

2008

Tipo de publicación

Artículo

Recurso de información

Formato

application/pdf

Fuente

Int J Food Microbiol. 125(1):71-78

Idioma

Inglés

Repositorio Orígen

Repositorio del Instituto Nacional de Pediatría

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