Author: MARIA ALEJANDRA MORENO GARCIA

Evaluación de anticuerpos anti-Trichinella spiralis obtenidos por inmunizaciones sublinguales y convencionales con la proteína 45kDa

Evaluation of Anti-Trichinella spiralis Obtained by Sublingual and Conventional Immunizations with the 45kDa Protein

MARIA ALEJANDRA MORENO GARCIA (2017)

Trichinellosis is a cosmopolitan zoonotic disease produced mainly by the consumption of poorly cooked swine meat. Several studies have probed the efficiency of immunotherapy as a method for the treatment of trichinellosis. In this work, a 45 kDa immunodominant antigen was characterized, and the presence of IgA, IgM and IgG anti-Trichinella spiralis antibodies was evaluated during the course of the infection. In addition, the differences between sublingual and parenteral administration of the 45 kDa T. spiralis antigen were

determined. Long Evans rats were used both to purify the 45 kDa antigen and to evaluate the immune response produced in six different groups: healthy and infected controls; two groups of immunized murines (sublingually and parenterally) with four doses of the 45 kDa T. spiralis immunogen administered at days 0, 7, 14 and 21 and challenged with 500 T. spiralis infective larvae (IL) 7 days after the last immunization; and finally, two groups of murines infected with 500 IL of T. spiralis, immunized at week 4 post infection by the same two routes. The humoral response was evaluated by indirect immunofluorescence by confocal microscopyin order to determine the presence of IgA, IgM and IgG antibodies.

La trichinellosis es una enfermedad parasitaria zoonótica y cosmopolita, se debe al consumo de carne deficientemente cocida, principalmente proveniente del cerdo, diversos estudios avalan la eficacia de la administración de inmunoterapia. Se ha caracterizado un antígeno inmunodominante de 45 kDa y se plantea como objetivo evaluar la presencia de anticuerpos IgA, IgM e IgG anti-Trichinella spiralis a lo largo de la infección, así como el comportamiento en la administración de la inmunización de 45 kDa de Trichinella spiralis

(T. spiralis) administrado por vía sublingual y vía parenteral. Se utilizaron 36 murinos (Long Evans), seis para la infección y purificación del antígeno de 45 kDa, 30 para formar los grupos de trabajo, control sano (cinco murinos), control infectado (cinco murinos), y 20 para los grupos experimentales, se inmunizaron dos grupos con cuatro dosis (0, 7, 14 y 21 días) del inmunógeno de 45 KDa de T. spiralis, uno por vía sublingual y otro por vía parenteral y se retaron con 500 larvas infectantes (LI) de T. spiralis siete días después de la ultima inmunización y dos grupos más se infectaron con 500 LI y se inmunizaron a las cuatro semanas postinfección por ambas vías. La respuesta se evaluó por inmunofluorescencia indirecta (IFI) por microscopia confocal para determinar la respuesta humoral con anticuerpos de clase IgG, IgM e IgA.

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BIOLOGÍA Y QUÍMICA diagnóstico inmunología parasitología diagnosis immunology parasitology

Resiniferatoxin lowers TNF-α, NO and PGE2 in the intestinal phase and the parasite burden in the muscular phase of Trichinella spiralis infection

MARIA ALEJANDRA MORENO GARCIA (2017)

During the course of infection with Trichinella spiralis, an inflammatory response is triggered at the intestinal level in the host, playing a crucial role in the expulsion and elimination of the parasite. However, several studies have demonstrated that this inflammatory response is harmful to the host; hence, the importance of studying molecules with therapeutic potential like resiniferatoxin, which is known to have an anti-inflammatory

effect both in vitro and in vivo. In this article, we evaluated the anti-inflammatory activity of resiniferatoxin during the intestinal phase of T. spiralis infection by quantitatively determining the levels of TNF-α, NO and PGE2 as well as the percentage of eosinophils in the blood and intestinal pathology. In addition, parasite burden was determined during the muscle infection. Our results show that resiniferatoxin lowered the serum levels of TNF-α, NO and PGE2, as well as the percentage of eosinophils in the blood and intestinal pathology during the intestinal infection. Moreover, resiniferatoxin also lowered the parasite burden in muscle, resulting in a

reduction of the humoral response (IgG) associated to treatment with resiniferatoxin. These findings suggest a potential therapeutic use of the anti-inflammatory effect of resiniferatoxin, which also contributes to host defence against the challenge of T. spiralis infection.

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BIOLOGÍA Y QUÍMICA eosinophilia inflammation resiniferatoxin Trichinella spiralis

Therapeutic Effects of Resiniferatoxin Related with Immunological Responses for Intestinal Inflammation in Trichinellosis

MARIA ALEJANDRA MORENO GARCIA (2017)

The immune response against Trichinella spiralis at the intestinal level depends on the CD4+ T cells, which can

both suppress or promote the inflammatory response through the synthesis of diverse cytokines. During the intestinal phase, the immune response is mixed (Th1/Th2) with the initial predominance of the Th1 response and the subsequent domination of Th2 response, which favor the development of intestinal pathology. In this context, the glucocorticoids (GC) are the pharmacotherapy for the intestinal inflammatory response in trichinellosis. However, its therapeutic use is limited, since studies have shown that treatment with GC suppresses the host immune system, favoring T. spiralis infection. In the search for novel pharmacological strategies that inhibit the Th1 immune response (proinflammatory) and assist the host against T. spiralis infection, recent studies showed that resiniferatoxin (RTX) had anti-inflammatory activity, which decreased

the serum levels of IL-12, INF-γ, IL-1β, TNF-α, NO, and PGE2, as well the number of eosinophils in the blood, associated with decreased intestinal pathology and muscle parasite burden. These researches demonstrate that RTX is capable to inhibit the production of Th1 cytokines, contributing to the defense against T. spiralis infection, which places it as a new potential drug modulator of the immune response.

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BIOLOGÍA Y QUÍMICA Trichinella spiralis trichinellosis inflammatory response Th1 cytokine resiniferatoxin

Análisis bacteriológico comparativo del agua de las clínicas urbana CLIMUZAC y rural CLITACO de la Facultad de Odontología de la Universidad Autónoma de Zacatecas

MARIA ALEJANDRA MORENO GARCIA (2006)

El objetivo de este estudio fue determinar comparativamente la calidad bacteriológica del

agua de las clínicas multidisciplinarias, urbana CLIMUZAC y rural CLITACO de la Facultad

de Odontología de la UAZ.

El estudio se realizó mediante las siguientes etapas:

1. Trabajo de campo, 2. Toma y transporte de muestras, 3. Procesamiento de muestras:

a) aislamiento, cuantificación de UFC/mL, de coliformes (NMP/100 mL o prueba presuntiva.

b) Determinación de coliformes totales y fecales (prueba confirmativa) e identificación

bacteriana.

Durante el trabajo de campo se encontraron anomalías diversas, después de analizadas las

muestras se encontró que en la mayoría de ellas, pero principalmente de las obtenidas de

jeringa triple, agua y pieza de mano, existía un número de bacterias coliformes (NMP/100

mL) muy por encima de lo permitido, de manera semejante, se encontró un elevado número

de UFC/mL corroborando lo anterior con las pruebas confirmativas a coliformes totales y

fecales, mismas que en la mayoría de estos casos resultaron positivas, lo cual nos indica

una contaminación directa por materia fecal hacia los instrumentos odontológicos. Las

bacterias que más frecuentemente se aislaron e identificaron en ambas clínicas (urbana y

rural) fueron E. coli, K. Pneumoniae, Streptococcus alfa, gamma y beta hemolíticos, Proteus

vulgaris, Pseudomonas fluorescens, P. aeruginosa, Sthaphylococcus albus, Sthaphylococcus

aureus, así como formas filamentosas Gram (-), E. aerogenes, Bacillus Gram (-), no

fermentadores de glucosa. Los resultados obtenidos nos muestran que conforme fluye el

agua desde los depósitos hasta su expulsión, dicho líquido se va contaminando, encontrándose

en mayor grado durante los meses de abril-agosto. El haber encontrado un alto grado

de contaminación bacteriana por microorganismos diversos incluyendo coliformes fecales,

Pseudomonas Streptococcus y Staphylococcus de manera particular en jeringa triple y

pieza de mano, debe de considerarse como una señal de alerta para que de inmediato se

tomen medidas de solución y en lo sucesivo se lleven a cabo periódicamente análisis

bacteriológicos de control. Por todo lo anterior, se concluye que mientras no se tomen

medidas más adecuadas inmediatas y de control preventivo de manera periódica de dichas

fuentes, existirá en pacientes y operadores odontólogos, un riesgo constante de contraer

infecciones microbiológicas, incluyendo las de transmisión de forma cruzada.

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BIOLOGÍA Y QUÍMICA Bacteriología-agua análisis comparativo clínica odontológica urbana y rural

Detección y permanencia de anticuerpos anti-Trichinella en ratas Long Evans productos de madres infectadas con Trichinella. spiralis.

MARIA ALEJANDRA MORENO GARCIA (2008)

En algunas especies hay paso de anticuerpos maternos dependiendo de las capas de la placenta, en modelo murino si hay paso de anticuerpos, en el siguiente trabajo se planteo el siguiente objetivo: Detección y

permanencia de anticuerpos anti-Trichinella spiralis en productos de madres infectadas con Trichinella spiralis.

Se utilizaron 20 ratas cepa Long Evans en edad fértil de dos meses de edad con un peso promedio de 250gr. Estos animales se dividieron en 4 tratamientos: Grupo A hembras infectadas con 1000 LI. de T. spiralis

sacrificándolas a las 4 semanas, Grupo B hembras infectadas con 1000 LI a los 8 días de fecundación, sacrificadas posterior al parto, Grupo C mismas condiciones que Grupo B pero se dividió en dos subgrupos (C1 y C2). Ratas Subgrupo C1 (2 ratas) se practicó cesárea 1 día antes del partosacricandose. Subgrupo C2 (3 ratas) se mantuvieron vivas las madres y los productos por un periodo de 12 meses posterior al parto,

Grupo D control de fecundidad. Se dividido en dos subgrupos (D1 y D2), el Subgrupo D1 (2 ratas) se sacrificaron posterior al parto, la madre y los productos. El Subgrupo D2 (3 ratas) se mantuvieron vivas las crías y las madres por un periodo de 12 meses posterior al parto. De cada grupo fueron 5 repeticiones.

Al todos los grupos se les tomo muestra de suero para la realización de técnicas inmunológicas MIDD e IET y toma de tejido para la búsqueda del parásito por técnicas de compresión y digestión artificial. A los animales

del subgrupo C2 y D2 se dejo 12 meses posteriores al parto y se toma muestra sanguínea para obtención de suero para realización de técnicas inmunológicas ya mencionadas.

Resultados: En el modelo murino se detecto paso de anticuerpos maternos los cuales tuvieron una permanencia de 8 meses, la carga parasitaria en madres gestante es de vital importancia ya que afecta la

gestación y produce abortos o partos prematuros.

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BIOLOGÍA Y QUÍMICA Fecundación productos anticuerpos T. spiralis

Evaluación por medio de intradermorreacción de la aplicación del inmunógeno de 45kDa de Trichinella spiralis para el diagnóstico de Trichinellosis

MARIA ALEJANDRA MORENO GARCIA (2016)

Diagnostic methods for different zoonotic diseases in the food industry have helped to control, treat and

eradicate several food-transmitted diseases such as Trichinellosis, a parasitic disease mainly transmitted

through consumption of poorly cooked meat, that is not commonly detected in any type of meat processing

facility. The main objective of this work is to evaluate the delayed hypersensitivity immunological mechanism

by administration of the 45 kDa Trichinella spiralis immunogen in order to develop an easy access and costeffective diagnostic method for the detection of the disease both in humans and animals. In this study, Long

Evans murines were distributed in six different groups: healthy and infected control groups, murinestreated

sublingually and conventionally with the 45 kDa immunogene after infection with T. spiralis, and murines

challenged with 500 infective larvae after sublingual and conventional immunization. The intradermal reaction

was performed using the 45 kDa immunogen in order to evaluate the delayed hypersensitivity by the triple

response of Lewis after 2, 6, 24 and 48 h. The statistical analysis performed, consisting in a multifactorial

analysis of variance, allowed us to detect significant differences between the groups considered (p < 0.05, CI:

95%), which led us to conclude that the 45 kDa antigen is a protein potentially usable for the diagnosis of

Trichinellosis.

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BIOLOGÍA Y QUÍMICA Diagnosis intradermal reaction Trichinella spiralis

El Cambio Climático y la Salud Humana

MARIA ALEJANDRA MORENO GARCIA (2016)

One of the worst crises that is currently undergoing humanity and the planet Earth is regarding environmental

pollution, climate change and global warming. This situation practically directly or indirectly is affecting all

aspects of social and individual life cultural, economic, political, educational, and health are being altered by

these situations. In this regard, they are endless objective and subjective evidence that every day become more noticeable and catastrophic: droughts, floods, fires, epidemics and atypical migrations in time and place are just some of these consequences we are having and if we do not quickly something compelling, future generations are at risk as well as its sustainability.

Una de las peores crisis por las que está atravesando en la actualidad la humanidad y el planeta Tierra lo es la

referente a la contaminación ambiental, el cambio climático y el calentamiento global. Esta situación está afectando, de forma directa o indirecta, todas las dimensiones de la vida social e individual; lo económico, lo político, lo educativo, lo cultural y la salud se están viendo alterados por estas situaciones. Al respecto hay un sinfín de evidencias objetivas y subjetivas que día a día se hacen más notorias y catastróficas: sequias, inundaciones, incendios, epidemias y migraciones atípicas en tiempo y lugar son tan solo algunas de estas consecuencias que estamos teniendo y si no hacemos rápidamente algo contundente, las futuras generaciones están en riesgo al igual que su sostenibilidad.

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MEDICINA Y CIENCIAS DE LA SALUD Contaminación Calentamiento global Efecto invernadero Dióxido de carbono Enfermedades Pollution Carbon dioxide Global change Warming effect Diseases

Espacios 100% libres de humo de tabaco en la UAZ, como prevención de la Epidemia del Tabaquismo

MARIA ALEJANDRA MORENO GARCIA (2015)

Introducción: La epidemia mundial del tabaquismo mata cada año a casi 6 millones de personas, de las cuales más de 600 000 son no fumadores que mueren por respirar humo ajeno. Si no actuamos, la epidemia matará a más de 8 millones de personas al año de aquí a 2030. Más del 80% de esas muertes evitables se producirán entre las poblaciones de los países de ingresos bajos y medianos (Organización Mundial de la Salud 2014).

De ahí la importancia de promover espacios 100% libres de humo de tabaco, esta acción entre los jóvenes que son la población susceptible.

En la UAZ con la implementación del Modelo académico UAZ Siglo XXI, contempla la formación integral de nuestros alumnos que conlleva a un desarrollo sostenible que sea para toda la vida.

Objetivo: Implementar en todos los espacios Universitarios, espacios 100 % libres de humo de tabaco.

Material y Métodos: El proceso se llevó en 2 etapas: (2007-2010), (2011-2013). Participando todos los sectores que conforman la UAZ, alumnos, docentes, trabajadores, autoridades administrativas. Procedimiento:

1.-Solicitud a la Secretaría de Salud, 2.- Que realizó cinco visitas, 3.-Que la Comunidad estuviera enterada del proceso, 4.-Colocación de ceniceros a la entrada del edificio, 5.-Señalamientos de espacio 100% libre de Humo de Tabaco, 6.-Señalamiento del Reglamento de la UAZ como espacio 100% libre de Humo de Tabaco.

Resultados: La primera Etapa, se certificó el área de Ciencias de la Salud y CECIUAZ. En la segunda etapa se certificó 45 espacios de la UAZ.

Conclusiones: Con este reconocimiento inicia el trabajo de retroalimentación y forma parte de la formación integral de nuestros alumnos, y del personal docente, trabajadores y administración central. Se programa una evaluación del programa en dos años.

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BIOLOGÍA Y QUÍMICA Espacios 100% libres de humo de tabaco UAZ

Evaluación del efecto protector de 2 inmunógenos de Trichinella spiralis en ratas Long Evans con modificación nutricional e infectado con Trichinella spiralis

MARIA ALEJANDRA MORENO GARCIA (2007)

The Trichinellosis is an endemic zoonotics, cosmopolitan, which is hosted in rats, pigs, and other mammals including humans. The presence of Trichinellosis is due to ingestion of insufficiently cooked swine meat. Poor countries with low medical resources are mainly affected by the disease. A numbered of immunogen have been characterized 45kDa was found to be the immunodominant most effective against T. spiralis, unfortunately a vaccine has not yet been found. Malnutrition (DN) effects have been described/detected in lymphatic organs. The immune mechanisms of the host have been altered with DN caloric-proteic (DPC). Objetive: The protective effect of two 2 immunogen of T. spiralis was evaluated in Long Evans rats with nutritional modifications and infected with T. spiralis. Methods: Eighty Long Evans rats (30 days old) were divided into two groups a 40 nut with 24% protein and a 40 DN with 12% protein of which eight groups were divided again into the different treatments: a) 10 control rats, b) 10 T. spiralis infected rats, c)10 immunized rats with total soluble antigens (AST), d) 10 immunized with 45 kDa of T. spiralis immunogen (one application per week in four dosages), challenged after the first week of immunization, sacrificed after the sixth week of post-infection. Evaluation parameters: Parasite charge determination using artificial digestion, (D/A), morphological characteristics of the nurse cell were determined by the tissue compression tests. Detention to immune response was determined by WB. Results: Different treatments to treat the nut, DN, immunized and infected rats were obtained by D/A. A significant difference was shown in the Ll quantities present in 30 g of muscle. The nut and DN rats control, in Ll absence, and in the groups of nut rats, 200 ul of Ll were collected, in the DN infected group 400ul of Ll were collected, in the Nut immunized with AST and infected, 10 ul of Ll were collected. Meanwhile the rats treated with DN recovered 100 ul of Ll. In a similar manner, the treatment for the Nut rats with vaccinated 45 kDa and the T. spiralis infection; it did not present Ll. while the DN treated recovered 10 ul of Ll, with morphological modifications. Conclussion: The parasite charge in treated animals with 45 kDa immunogen was negative in Nut group.

La Trichinellosis es una zoonosis endémica, cosmopolita, sus huéspedes son, ratas, cerdo y otros mamíferos entre ellos el hombre, la presencia de Trichinellosis se debe a la ingestión de carne de cerdo insuficientemente cocinada, afecta a países con bajos recursos económicos. Se han caracterizado Inmunógenos, siendo el inmunodominante el de 45 kDa, efectivo contra T. spiralis, desafortunadamente no ha cristalizado en una vacuna. Se han descrito efectos de desnutrición (DN) sobre órganos linfáticos. Los mecanismos de defensa del huésped son alterados con DN proteico-calórico (DPC). Objetivo: Evaluar el efecto protector de 2 inmunógenos de T. spiralis en ratas Long Evans con modificación Nutricional e infectado con T. spiralis Metodología: 80 ratas Long Evans de 30 días de edad, divididas en 2 grupos: 40 Nut con 24 % de proteína y 40 DN con 12 % de proteína de los cuales se subdividieron en 8 sub grupos con tratamiento: a) 10 animales control b)10 animales infectados con T. spiralis, c) 10 animales inmunizados con antígeno soluble total (AST), d) 10 animales inmunizados con inmunógeno de 45 kDa de T. spiralis (esquema de inmunización una aplicación cada semana por 4 ocasiones), retados a la 1era semana de la culminación de inmunización, sacrificadas a la 6 sexta semana post-infección. Parámetros a evaluar: Determinación de la carga parasitaria mediante la Digestión Artificial (D/A), Determinación de las características morfológicas de la célula nodriza por la técnica de compresión de tejidos, detección de la respuesta inmune por WB. Resultados: Con la técnica de D/A, se obtuvieron en los diferentes tratamientos, de las ratas Nut, DN, Inmunizadas e Infectadas. Mostró diferencia significativa en la cantidad de LI que se presentaron en 30gr de músculo estriado. los grupos controles de ratas Nut y DN sin infección, ausencia de LI, y en los grupos de ratas Nut Infectadas, se recolectaron 200 μl de LI, para el grupo de DN infectado se recolecto 400 μl de LI, en el grupo de Nut inmunizadas con AST e infectadas, se recolectó 10 μl de LI, mientras que en las tratadas con DN se recuperaron 100μl de LI. En el tratamiento de ratas Nut inmunizadas con antígeno de 45 kDa más infección de T. spiralis, no presento LI, mientras que en las tratadas con DN se recuperaron 10 μl de LI, con modificaciones morfológicas. Conclusión: la carga parasitaria en animales tratados con inmunógeno de 45 kDa nutridos fue negativa.

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BIOLOGÍA Y QUÍMICA inmunogéno modificaciones nutricionales Trichinella spiralis

El uso de animales en el laboratorio de experimentación

MARIA ALEJANDRA MORENO GARCIA (2007)

The next Project has the objective of realize patent the importance of

animal use in the laboratory, That thanks to the different animal models

the science has developed an important way, making more easily the

biology knowledge, physiology and the power for establish diagnostic

and treatments that improve human quality life.

􀁺 As the same that the importance to work with ethic and without making

unnecessarily harm to animal models, preventing them suffer, and pain.

􀁺 The science with its actual expound and evolution has showed the

corporal similarities and genomical between the variety of biologic

species, reagree the existence from the continuity from the evolution of

live in our planet and similarities of identity between the different

individuals. Something of each animal exist in a human been and the

level that it reaches thanks to the intellect must be benefit for humanity

and the animal and vegetal kingdoms that share in this earth planet.

El presente trabajo tiene como objetivo hacer patente la importancia

del uso de animales en el laboratorio, que gracias a los diferentes

modelos animales la ciencia se ha desarrollado de una forma

importante, facilitando el conocimiento de la biología y fisiología y poder

establecer diagnósticos y tratamientos que mejoran la calidad de vida

del hombre.

􀁺 Así mismo la importancia de trabajar con ética y sin hacer daño

innecesario a los modelos animales, evitándoles sufrimiento y dolor.

􀁺 La ciencia, con su actual desarrollo ha demostrado las similitudes

corporales y geonómicas entre las distintas especies biológicas,

reafirma la existencia de la continuidad de la evolución de la vida en

nuestro planeta y semejanza de identidad entre los distintos individuos.

Algo de todo animal hay en el ser humano y el nivel que éste alcanza

gracias a su intelecto debe ser de beneficio para la humanidad y los

reinos animal y vegetal que comparten en este planeta tierra.

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BIOLOGÍA Y QUÍMICA animales experimental laboratorio