Prevalencia y factores de riesgo de lesiones precursoras de cáncer cervicouterino en el Hospital de la Mujer Yautepec, Morelos

BEATRIZ LOPEZ DE LA CRUZ (2023, [Otro, Trabajo terminal, especialidad])

Las lesiones intraepiteliales del cuello uterino son alteraciones celulares precursoras a

una neoplasia maligna y de acuerdo al grado de alteración y cantidad de epitelio

involucrado se estadifican. Su comportamiento difiere al involucionar de manera

espontánea, persistir o progresar a cáncer cervicouterino, esto ocurre durante un tiempo

variable y esta evolución se encuentra relacionada directamente con factores de riesgo de

tipo ginecobstétricos y demográficos. Con el objetivo de conocer la prevalencia y los

factores de riesgo se realizó un estudio de diseño de casos y controles, retrospectivo,

observacional, transversal y analítico en la población que recibió atención médica en la

clínica de displasias del hospital de la mujer de los servicios de salud de Morelos, durante

el período del 01 de Enero del 2019 al 31 de Diciembre del 2019. Se analizaron historias

clínicas de pacientes con diagnóstico histopatológico de displasia cervical así como

controles. Se evaluó la asociación de lesiones precursoras de cáncer cervicouterino con

las variables factores de riesgo, realizando modelos de regresión logística de tipo

univariado y multivariado para valorar su prevalencia, significancia estadística y sinergia.

La prevalencia de las lesiones precursoras de cáncer cervicouterino reportada con la

esperada en la población mexicana fue del 16.85%. Resultando de relevancia el hábito de

tabaquismo, tiempo de actividad sexual, edad de inicio de vida sexual, número de parejas

sexuales, menarca y número de partos, respecto a la proporción casos. Los factores que

se encontraron significativamente asociados con la presencia de lesión preneoplásica de

alto grado son tabaquismo, tiempo de actividad sexual y la multiparidad (Tabla 3). En el

análisis multivariado se estudiaron los más relevantes factores de riesgo (tabla 4 y 5) y

con el fin de valorar la asociación entre los mismos nos mostró que el tiempo de actividad

sexual supone un riesgo mayor, en donde la presencia de tabaquismo posee la mayor

asociación para lesiones de alto grado, y precediendo la multiparidad. Por lo tanto se

concluye que el hábito del tabaquismo y la multiparidad está directamente relacionado con

lesiones precursoras, esto debido a la presencia de lesiones traumáticas generadas en el

parto, la reepitelización cervical que ocurre en la zona de transformación y la exposición a

sustancias del tabaco, proporciona mayor vulnerabilidad a un daño celular. El tiempo de

actividad sexual potencializa el riesgo, esto debido a que condiciona mayor número de

exposición al resto de los factores.

Intraepithelial lesions of the cervix are cellular alterations that are precursors to a

malignant neoplasia and are staged according to the degree of alteration and amount of

epithelium involved. Its behavior differs by spontaneously regressing, persisting or

progressing to cervical cancer, this occurs for a variable time and this evolution is directly

related to gynecobstetric and demographic risk factors. With the objective of knowing the

prevalence and risk factors, a case-control design, retrospective, observational, cross-

sectional and analytical study was carried out in the population that received medical care

in the dysplasia clinic of the women's hospital of the services of Morelos health, during the

period from January 1, 2019 to December 31, 2019. Medical records of patients with

histopathological diagnosis of cervical dysplasia as well as controls were analyzed. The

association of cervical cancer precursor lesions with the risk factor variables was

evaluated, performing univariate and multivariate logistic regression models to assess their

prevalence, statistical significance and synergy. The prevalence of cervical cancer

precursor lesions reported with that expected in the Mexican population was 16.85%. The

smoking habit, time of sexual activity, age at the beginning of sexual life, number of sexual

partners, menarche and number of births, with respect to the proportion of cases, are of

relevance. The factors that were found to be significantly associated with the presence of a

high-grade preneoplastic lesion are smoking, time of sexual activity, and multiparity (Table

3). In the multivariate analysis, the most relevant risk factors were studied (tables 4 and 5)

and in order to assess the association between them, it showed that the duration of sexual

activity represents a greater risk, where the presence of smoking has the greater

association for high-grade lesions, and preceding multiparity. Therefore, it is concluded

that the habit of smoking and multiparity is directly related to precursor lesions, due to the

presence of traumatic lesions generated during childbirth, cervical reepithelialization that

occurs in the transformation zone and exposure to tobacco substances. , provides greater

vulnerability to cellular damage. The time of sexual activity potentiates the risk, this is

because it determines a greater number of exposure to the rest of the factors.

MEDICINA Y CIENCIAS DE LA SALUD CIENCIAS MÉDICAS

Efectos de un programa psicomotriz y estimulación cognitiva en pacientes con deterioro cognitivo leve y demencia

KARLA MARISOL VALENCIA QUIROZ (2024, [Tesis de maestría])

En los últimos años se ha observado un incremento de los casos de deterioro cognitivo y

demencias en todo el mundo. Diversas organizaciones internacionales y nacionales alertan

sobre la emergencia sanitaria que representa la demencia al catalogarla como una de las

principales causas de discapacidad en personas adultas mayores, así como reportes de un

crecimiento acelerado mayor al estimado y su prevalencia mayoritariamente en mujeres

(Organización Mundial de la Salud [OMS], 2021; Organización Panamericana de la Salud

[OPS], 2022; Secretaría de Salud [SS], 2021)

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Evaluación integrada de riesgo asociado a mercurio en sitios con minería artesanal de mercurio

ARLETTE ANDREA CAMACHO DE LA CRUZ (2019, [Tesis de doctorado])

En la actualidad México es uno de los principales países productores y exportadores de mercurio a nivel mundial, la producción de mercurio en México se efectúa principalmente de forma artesanal, lo cual afecta significativamente a los ecosistemas. El objetivo del presente trabajo fue evaluar el impacto del mercurio sobre la salud en localidades de México con minería artesanal de mercurio, utilizando como herramienta la evaluación integrada de riesgo. En el estudio se incluyeron las siguientes comunidades: La Tapona, Villa Hidalgo, San Luis Potosí; La Plazuela, Peñamiller, Querétaro; y Llano de San Francisco y Bucareli, pertenecientes al municipio de Pinal de Amoles, en el Estado de Querétaro. Para cumplir con el objetivo de este trabajo se llevó a cabo la determinación de las concentraciones de mercurio elemental gaseoso en aire y de mercurio total en: agua, suelo, plantas, hígado y riñones de roedores, lombrices, y en orina de niños, mujeres y mineros. Cabe mencionar que en las localidades La Tapona y La Plazuela solo se evaluó el riesgo en salud humana, y en el caso de las localidades de Pinal de Amoles se realizó una evaluación integrada de riesgo. En las matrices ambientales: aire y suelo, se observaron concentraciones por encima de los valores establecidos como referencia a nivel nacional e internacional; en cuanto a plantas se notó que los niveles de mercurio en hojas incrementan conforme a la cercanía con las zonas de minería artesanal de mercurio; las concentraciones en tejidos de roedores y en lombrices se mostraron superiores a las determinadas en especies de un sitio de referencia; y en humanos los valores de mercurio urinario también se encontraron por arriba de niveles de referencia fijados internacionalmente. Dentro de las principales rutas de exposición a mercurio identificadas se encuentran: el aire para el caso de plantas, niños, mujeres y mineros; el suelo para lombrices, roedores y niños; así como las plantas para los roedores, ya que estas forman parte de su dieta. Con los resultados obtenidos se demuestra la influencia de la minería artesanal de mercurio en el incremento de los niveles de este elemento en los diferentes componentes del ecosistema, asimismo se concluye que tanto la población humana como la biota se encuentran en riesgo de padecer efectos adversos en salud relacionados con este contaminante, y por lo tanto existe la imperiosa necesidad de diseñar e implementar estrategias de intervención para reducir y prevenir la contaminación por mercurio, y por ende el riesgo por exposición a este elemento, para cumplir con lo anterior derivado de esta investigación se propone un nuevo enfoque de trabajo denominado Salud Total.

Nowadays, México is one of the world's leading mercury producing and exporting countries, the production of mercury in México is carried out in a handcrafted way, which significantly affects ecosystems. The objective of this work was to assess the impact of mercury on health in localities of México with artisanal mercurymining, using the integrated risk assessment as a tool. The following communities were included in the study: La Tapona, Villa Hidalgo, San Luis Potosí; La Plazuela, Peñamiller, Querétaro; and Llano de San Francisco and Bucareli, belonging to the municipality of Pinal de Amoles, in the State of Querétaro. To meet the objective of this work was carried out the determination of the concentrations of gaseous elemental mercury in air, and total mercury in water, soil, plants, liver and kidneys of rodents, worms, and in the urine of children, women and miners. It is worth mentioning that in the localities of La Tapona and La Plazuela only the risk in human health was evaluated, and in the case of the Pinal de Amoles localities an integrated risk assessment was carried out. In the environmental matrices: air and soil, concentrations were observed above the values established as reference at national and international level; as for plants it was noted that the levels of mercury in leaves are increased according to the proximity with the areas of artisanal mercury mining; concentrations in rodent and earthworm tissues were higher than those determined in species at a reference site; and in humans, urinary mercury values were also found above reference levels set in international regulations. Among the main routes of exposure to mercury identified are: the air for the case of plants, children, women and miners; soil for worms, rodents and children; as well as plants in the case of rodents as they are part of their diet. With the results obtained, the influence of the artisanal mining of mercury in the increase of the levels of this element in the different components of the ecosystem is demonstrated, it is also concluded that both the human population and the biota are at risk of suffering adverse effects in health related to this pollutant, and therefore there is the imperative need to design and implement intervention strategies to reduce and prevent mercury pollution, and hence the risk by exposure to this element, to comply with the above, derived from this investigation a new work approach called Total Health is proposed.

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Evaluación de riesgo en salud en dos sitios contaminados por bifenilos policlorados (PCBs) y metales pesados

ROGELIO COSTILLA SALAZAR (2010, [Tesis de doctorado])

MEDICINA Y CIENCIAS DE LA SALUD

miRNAs contained in extracellular vesicles cargo contribute to the progression of idiopathic pulmonary fibrosis: an in vitro aproach

JOVITO CESAR SANTOS ALVAREZ JUAN MANUEL VELAZQUEZ ENRIQUEZ ROSENDO GARCÍA CARRILLO CESAR RODRIGUEZ BEAS ALMA AURORA RAMIREZ HERNANDEZ EDILBURGA REYES JIMENEZ KARINA GONZÁLEZ GARCÍA ARMANDO LOPEZ MARTINEZ LAURA PEREZ CAMPOS MAYORAL SERGIO ROBERTO AGUILAR RUIZ MARIA DE LOS ANGELES ROMERO TLALOLINI HONORIO TORRES AGUILAR LUIS ALBERTO CASTRO SANCHEZ JAIME ARELLANES ROBLEDO VERONICA ROCIO VASQUEZ GARZON RAFAEL BALTIERREZ HOYOS (2022, [Artículo])

Idiopathic pulmonary fibrosis (IPF) is a chronic, progressive lung disease. Lesions in the lung epithelium cause alterations in the microenvironment that promote fibroblast accumulation. Extracellular vesicles (EVs) transport proteins, lipids, and nucleic acids, such as microRNAs (miRNAs). The aim of this study was to characterize the differentially expressed miRNAs in the cargo of EVs obtained from the LL97 and LL29 fibroblast cell lines isolated from IPF lungs versus those derived from the CCD19 fibroblast cell line isolated from a healthy donors. We characterized EVs by ultracentrifugation, Western blotting, and dynamic light scattering. We identified miRNAs by small RNA-seq, a total of 1144 miRNAs, of which

1027 were known miRNAs; interestingly, 117 miRNAs were novel. Differential expression analysis showed that 77 miRNAs were upregulated and 68 were downregulated. In addition, pathway enrichment analyses from the Gene Ontology and Kyoto Encyclopedia of Genomes identified several miRNA target genes in the categories, cell proliferation, regulation of apoptosis, pathways in cancer, and proteoglycans in cancer. Our data reveal that miRNAs contained in EVs cargo could be helpful as biomarkers for fibrogenesis, diagnosis, and therapeutic intervention of IPF.

MEDICINA Y CIENCIAS DE LA SALUD Idiopathic pulmonary fibrosis Extracellular vesicles Fibroblasts Small-RNA seq

Estudio del efecto del uso de coformadores isoméricos en la ventaja de solubilidad y cinética de disolución de cocristales de praziquantel

ALONDRA LUGARDA ROMÁN (2023, [Tesis de maestría])

El praziquantel (PZQ) es un antihelmíntico de amplio espectro eficiente en la terapia de enfermedades parasitarias como la esquistosomiasis y la neurocisticercosis. Este fármaco pertenece al grupo II del Sistema de Clasificación Biofarmacéutico (SCB) debido a que posee alta permeabilidad y baja solubilidad en medios acuosos, además la dosis que se administra en humanos (600 mg) es 9 veces mayor de lo que se puede disolver en un volumen luminal de 250 mL. Estas condiciones indican que la absorción y biodisponibilidad de PZQ se ven limitadas por la solubilidad y velocidad de disolución de este.

Novedosamente, se ha demostrado que los cocristales farmacéuticos modifican las

propiedades fisicoquímicas y biofarmacéuticas de principios activos poco solubles en agua. Bajo este contexto, el objetivo de este trabajo es evaluar el impacto del uso de coformadores regioisoméricos como el ácido maleico (MALE) y el ácido fumárico (FUM) para estudiar la solubilidad termodinámica y la cinética de disolución de cocristales de praziquantel.

Las fases cocristalinas PZQ-FUM y PZQ-MALE se obtuvieron mediante el método de reacción de cristalización y molienda mecanoquímica asistida con gota de disolvente. Teniendo en cuenta los resultados de la caracterización física y espectroscópica, se demostró que se sintetizaron con éxito los cocristales de praziquantel. De manera particular, el sólido de PZQ-MALE obtenido por reacción de cristalización se identificó como un nuevo polimorfo del cocristal (PZQ-MALE II) mostrando diferentes propiedades fisicoquímicas que PZQ-MALE I.

Los cocristales de PZQ se almacenaron bajo diferentes condiciones de estrés de humedad y temperatura. Los análisis por DRXP mostraron que la fase cocristalina de PZQ-FUM no presenta transformación de fase; sin embargo, PZQ-MALE II se transformó a 40॰C y 75% HR, mientras que PZQ-MALE I resultó ser estable en todas las condiciones experimentales.

En los estudios biofarmacéuticos realizados, los valores de ventaja de solubilidad (SA) y constante eutéctica (Keu) demostraron que PZQ-FUM y los polimorfos del cocristal PZQ-MALE eran más solubles que praziquantel, además, la curva de solubilidad-pH indicó que las fases cocristalinas tienen el potencial de impartir solubilidad dependiente del pH.

Los polimorfos de PZQ-MALE mostraron una ventaja de solubilidad (SA) mayor en

comparación con PZQ-FUM en HCl pH 1.2, pero los cocristales con SA más alto, no

presentaron un comportamiento de disolución mejorado. Los estudios de disolución de PZQ-FUM con SA inferior mostraron que es capaz de promover una supersaturación, con un aumento significativo de la concentración de praziquantel en solución. En presencia de exceso de coformador predisuelto en el medio de disolución, se observó la solubilización sostenida de PZQ a partir del cocristal PZQ-FUM, aumentando el ABC₀-₁₂₀ hasta en 2 veces en comparación con PZQ prístino.

Con estos resultados se demuestra que el cocristal PZQ-FUM podría ser una alternativa a la fase contenida en la formulación comercial, ya que presentó ventajas biofarmacéuticas mejoradas sobre la solubilidad, el perfil de disolución y la cantidad total disuelta (ABC) de PZQ.

Praziquantel (PZQ) is a broad-spectrum anthelmintic effective in the therapy of parasitic diseases for schistosomiasis and neurocysticercosis. PZQ is class II according to the Biopharmaceutical Classification System (BCS) because it has low solubility in water and good permeability in addition to human doses of PZQ (600 mg) that are more than 9 times higher than what can be dissolved in a luminal volume of 250 mL. Thus solubility and dissolution kinetics are the rate limiting steps in the absorption and bioavailability of PZQ.

Recently, pharmaceutical cocrystals have shown to modify the physicochemical and

biopharmaceuticals properties of drugs having low aqueous solubility. The purpose of the present study was to investigate the impact of isomeric coformers (maleic-fumaric acids) to enhance the thermodynamic solubility and kinetics dissolution of praziquantel cocrystals.

PZQ-FUM and PZQ-MALE was obtain by reaction crystallization method and mechanical liquid-assisted grinding. Considering the physical and spectroscopic characterization it was demonstrated that praziquantel cocrystals were successfully obtained. In particular, cocrystal PZQ-MALE obtained by reaction crystallization was identified as a new polymorph cocrystal (PZQ-MALE II) and has different physicochemical properties than PZQ-MALE I.

Cocrystals PZQ were stored under different humidity and temperature stress conditions. PXRD analyses showed that PZQ-FUM has not physical transformation. PZQ-MALE II was transformed to 40 ॰C and 75% RH, while PZQ-MALE I was stable at all experimental conditions.

In biopharmaceutical studies, the values de SA y Kₑᵤ showed that both cocrystals were more soluble than the drug, and the shape of the solubility–pH curve indicated that cocrystals had the potential to impact pH-dependent solubility.

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Intervenciones de enfermería: prevención, seguimiento y control de lesiones de piel en pacientes de alto riesgo

VERÓNICA ANTÚNEZ MARTÍNEZ (2023, [Otro, Trabajo terminal, especialidad])

La calidad y seguridad del paciente a nivel mundial es un aspecto relevante para los

sistemas hospitalarios debido a su impacto ético y financiero. La Organización Mundial

de la Salud [OMS] (2022)¹

, estima que uno de cada 10 pacientes que vive en países

industrializados sufre de eventos adversos mientras reciben cuidados de salud; esta

inadecuada atención al paciente genera gastos en la atención, de hospitalización,

infecciones nosocomiales y discapacidad²⁻³

.

En México, las úlceras por presión (UPP) son un indicador de calidad en el Sistema

Nacional de Salud, se otorga relevancia a los conocimientos de los profesionales de la

salud en cuanto al abordaje integral de las úlceras para el mejoramiento de la seguridad

del paciente³

.

En México, a partir de 1999 se desarrolló el modelo de calidad para la seguridad del

paciente, el cual está conformado por metas internacionales, estándares centrados en el

paciente y estándares centrados en la gestión. La creación y desarrollo de este modelo

tiene como finalidad mejorar la calidad de los servicios de atención y de la seguridad que

se brinda a los pacientes, sobretodo, durante su estancia hospitalaria (Consejo de

Salubridad General, 2019)⁴

La seguridad del paciente se define como la evitación y prevención de fallas en la

atención que se proporciona en los servicios sanitarios, con la finalidad de evitar eventos

adversos que pongan en riesgo la vida de los usuarios. Además, es un componente

prioritario de la calidad asistencial, donde el personal de enfermería juega un papel

importante por ser uno de los principales proveedores de cuidados. Durante la estancia

hospitalaria de un paciente existe el riesgo de que se presenten eventos adversos como

resultado de la atención, estos eventos son daños causados al paciente por un

procedimiento cuyo resultado no es atribuible a la enfermedad o condición de salud que

originó la búsqueda de atención⁴

Estos errores producto de la atención que se proporciona, por ejemplo administrar una

dosis incorrecta al paciente, se denominan error de comisión; sin embargo, durante la

práctica existen también procedimientos que no se realizan de acuerdo a las demandas

del paciente, por ejemplo, ayudar en la deambulación, estos se denominan error de

omisión del cuidado de enfermería que representa un problema mayor en el paciente, por

lo tanto perdido es considerando ayuda en la deambulación tres veces al día, la

educación al paciente, higiene de boca, cambios de posición del paciente cada dos horas,

baño en cama, cuidado de la piel, la vigilancia adecuada y el desarrollo o actualización

de los planes de cuidados de enfermería⁴

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Prevalencia y factores obstétricos asociados a la disfunción del piso pélvico en primíparas durante el puerperio inmediato

LUIS FERNANDO GARCIA RODRIGUEZ (2023, [Artículo])

Introducción: El parto vaginal puede ser un evento traumático que impacta en los músculos pélvicos, los nervios y el tejido conectivo. Numerosas investigaciones respaldan la idea de que las mujeres que experimentan un parto vaginal tienen un riesgo más alto de desarrollar incontinencia y prolapso de órganos pélvicos en comparación con aquellas que nunca han tenido hijos (nulíparas) y las mujeres que han optado por una cesárea como método de parto.

Poder identificar a las pacientes con mayor riesgo de presentar una disfunción del piso pélvico y en ellas, poder iniciar la rehabilitación de los músculos del piso pélvico de forma temprana, para así, disminuir el riesgo de presentar una disfunción del piso pélvico o reducir las molestias causadas por la disfunción del piso pélvico.

Objetivo: Determinar el grado de asociación de los factores obstétricos estudiados con el desarrollo de disfunción del piso pélvico durante el puerperio inmediato y a 30 días de seguimiento en pacientes primíparas atendidas en el Hospital Regional Materno Infantil de Nuevo León.

Métodos: Estudio observacional de casos y controles. Se incluyeron pacientes primigestas con resolución obstétrica en el Hospital Regional Materno Infantil de Nuevo León que se encuentren en el puerperio inmediato. Se revisaron los expedientes de las pacientes que otorgaron su autorización a participar en el estudio y se extrajo la información relevante de las pacientes primíparas que hayan tenido resolución obstétrica en el Hospital Regional Materno Infantil dura el periodo de enero a febrero del 2023. A cada participante se le aplicó una serie de encuestas auto- aplicables determinadas en 2 tiempos diferentes, en el puerperio inmediato y el segundo tiempo por vía telefónica al cumplir los 30 días de puerperio; estos cuestionarios fueron el índice de la función sexual femenina y el inventario de problemas del piso pélvico (cuestionario corto 20 o PFDI-20).

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Resultados: No hubo asociación entre los factores maternos o fetales basales con la presencia o no de disfunción de piso pélvico. A la resolución del embarazo, los hallazgos más frecuentes fueron pérdida involuntaria de gases (51.3%), incontinencia de urgencia (34.2%), incontinencia de esfuerzo (32.9% y dolor al defecar (21.5%), mientras que fueron dolor al defecar (41.2%), dispareunia (37.5%) pérdida involuntaria de gases (37.5%) e incontinencia de urgencia (27.5%) posterior a un mes de seguimiento del puerperio. Se encontró una correlación negativa moderada-baja entre el perímetro cefálico del neonato y el puntaje total de PFDI-20, y una correlación positiva baja entre el deseo con los síntomas colo-rectales-anales, urinarios y el puntaje total de PFDI-20 durante el puerperio inmediato, así como una correlación positiva moderada-baja los síntomas urinarios y el deseo sexual, y en el total del índice de función sexual femenina.

Conclusión: No se identificaron factores obstétricos maternos o fetales asociados con disfunción pélvica en el puerperio inmediato o tardío. Sin embargo, la prevalencia de DPP es alta y no debe ser obviada, ya que se requiere una enorme atención e identificación de este tipo de pacientes para poder realizar intervenciones tempranas y mejorar la calidad de vida.

Especialidad en Ginecologia y Obstetetricia

MEDICINA Y CIENCIAS DE LA SALUD CIENCIAS MÉDICAS CIENCIAS CLÍNICAS GINECOLOGÍA

Niveles de PCR ultrasensible a la admisión asociados a NIHSS mayor a 4 puntos al egreso en la enfermedad vascular cerebral isquemica aguda

GIOVANA FEMAT ROLDAN (2023, [Artículo])

https://orcid.org/0000-0001-9572-4770

Se realizo un estudio retrospectivo observacional utilizando los expedientes de los pacientes con EVC isquemico atendidos en los hospitales del sistema Tec Salud entre los años 2017 y 2022. El objetivo del estudio era identificar la asociación entre los niveles de PCR ultrasensible tomados al ingreso y la severidad del EVC isquemico medida por medio de la escala NIHSS al egreso hospitalario, se realizo una regresión logística binominal, dicotomizando la muestra/expedientes estudiados en 2 grupos: 1 grupo con pacientes con NIHSS moderado severo: NIHSS > 4 puntos y pacientes con NIHSS bajos: NIHSS 1-4 puntos. Como resultado se obtuvo un riesgo relativo de 1.72, esto se traduce en que los pacientes con niveles de PCR ultrasensible más altos tenían 1.72 veces más posibilidad de tener un EVC isquemico con un NIHSS > 4 puntos al egreso.

Especialidad en Neurología

MEDICINA Y CIENCIAS DE LA SALUD CIENCIAS MÉDICAS MEDICINA INTERNA NEUROLOGÍA

Establecimiento de las condiciones para el análisis de expresión diferencial de la interacción Typha latifolia-Pseudomonas rhodesiae

Joana Guadalupe Martínez Martínez (2024, [Tesis de maestría])

Se ha demostrado que la inoculación de rizobacterias promotoras de crecimiento vegetal

(PGPR) en plantas acumuladoras de metales pesados incrementa la eficiencia de la

fitorremediación. Pseudomonas rhodesiae GRC140 es considerada una PGPR debido a la

producción de sideróforos, ácido indolacético, ACC-desaminasa y solubilización de fosfatos.

Por su parte, Typha latifolia es una de las plantas más utilizadas en fitorremediación por su

capacidad para tolerar y remover metales pesados, pero la mayoría de los estudios se han

enfocado en las capacidades de remoción de Cd en humedales artificiales, in situ e in vitro,

por lo que se desconocen los mecanismos moleculares en respuesta al estrés por Cd. Los

estudios genómicos permiten explicar los mecanismos implícitos y pueden aprovecharse para

lograr una mayor fitorremediación. Por lo anterior, el objetivo de este trabajo fue estandarizar

las condiciones de la interacción de T. latifolia-P. rhodesiae GRC140 para el análisis de

RNAseq. Inicialmente, se realizó un ensayo de germinación en el que se determinó la tasa de

germinación y se evaluó la longitud y el peso fresco y seco de brotes y raíces. Posteriormente,

se estableció el cultivo in vitro de T. latifolia en sistemas de hidroponía y se siguió un diseño

experimental donde las plántulas estuvieron expuestas 10 días a distintos tratamientos con P.

rhodesiae GRC140 y 40 mg/L Cd. Al finalizar la exposición, se realizó un análisis fenotípico,

se estudió el comportamiento del pH en el medio hidropónico, se determinó el contenido de

glutatión total, el porcentaje de fuga de electrolitos, se cuantificaron los niveles de Cd

mediante EAA, se aisló el ARN total vegetal y se determinó la expresión de los genes de

metalotioneína, fitoquelatina sintasa, CL7951, CL354, CL3870 y Unigene11164 por RTqPCR. Los resultados mostraron que P. rhodesiae GRC140 induce el desarrollo temprano de

T. latifolia y mejora el porcentaje de germinación en semillas expuestas a Cd, además,

promueve el crecimiento vegetal en plántulas de 15 días de crecimiento. En condiciones

hidropónicas, P. rhodesiae GRC140 promueve el desarrollo de pelos radiculares en T.

latifolia. Se incrementó la fuga de electrolitos y el contenido de GSH en el tejido radicular

de plántulas expuestas a Cd, mientras que P. rhodesiae GRC140 minimizó el contenido de

GSH hasta niveles basales. P. rhodesiae GRC140 mejoró el contenido de Cd en brotes y

raíces de T. latifolia, el BCF y el BAC. Los genes de metalotioneína, CL7951, CL354,

CL3870 y Unigene11164 se encontraron reprimidos en T. latifolia expuesta a Cd, mientras

que P. rhodesiae GRC140 indujo la expresión del gen CL3870, después de 10 días deVI

interacción. Los resultados de este trabajo son la base para realizar análisis de expresión y

genómica funcional de la interacción de T. latifolia-P. rhodesiae GRC140 y tratar de

desarrollar estrategias eficientes en la fitoextracción de Cd por T. latifolia.

Plant Grow Promoting Rhizobacteria (PGPR) inoculation has been shown to increase heavy

metal accumulation and then phytoremediation efficiency. Pseudomonas rhodesiae GRC140

is considered a PGPR due to the production of siderophores, indoleacetic acid, ACCdeaminase, and phosphate solubilization. Typha latifolia is one of the plants most used in

phytoremediation due to its ability to tolerate and remove heavy metals. Most studies have

focused on the Cd removal capacities in artificial wetlands, in situ and in vitro. However, the

molecular mechanisms involved in response to Cd stress or in its interaction with PGPR

during phytoremediation processes remain unknown. Genomic studies allow the implicit

mechanisms to be explained and these can be used to achieve greater phytoremediation.

Therefore, the aim of this work was to standardize the conditions of T. latifolia-P. rhodesiae

GRC140 interaction to perform RNAseq analysis. Initially, germination tests were carried

out to determine germination rate, the root length, and fresh and dry weight of shoots.

Besides, T. latifolia in vitro cultures were established in hydroponic systems and the

seedlings were exposed to P. rhodesiae GRC140, 40 mg/L Cd, or both for 10 days.

Phenotypic analysis, pH of the hydroponic medium, total glutathione, electrolyte leakage

percentage, and Cd quantitation by EAA were determined. Total RNA of treated plants was

isolated and the expression of metallothionein, phytochelatin synthase, CL7951, CL354,

CL3870 and Unigene11164 genes were determined by RT-qPCR. The results showed that P.

rhodesiae GRC140 induces the early development of T. latifolia and improves the

germination percentage in seeds exposed to Cd. In addition, bacterium promotes plant growth

in 15-day-old seedlings. Under hydroponic conditions, P. rhodesiae GRC140 promotes root

hair development in T. latifolia. Electrolyte leakage and GSH content were increased in the

root tissue of seedlings exposed to Cd, while P. rhodesiae GRC140 decreased GSH content

to basal levels. P. rhodesiae GRC140 improved the Cd content in shoots and roots, the BCF

and the BAC of T. latifolia exposed to Cd. Metallothionein, CL7951, CL354, CL3870 and

Unigene11164 were downregulated in T. latifolia exposed to Cd, while P. rhodesiae

GRC140 upregulated CL3870 gene, after 10 days of interaction. The results of this work are

the basis to carry out functional genomics analyzes of the T. latifolia-P. rhodesiae GRC140

interaction and try to develop efficient strategies in the phytoextraction of Cd by T. latifolia.

BIOLOGÍA Y QUÍMICA MEDICINA Y CIENCIAS DE LA SALUD