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Molecular characterization of Yucatan tomato phytoplasma (Group 16Sr III)

RAUL TAPIA TUSSELL ALBA PRISCILIA SUASTE DZUL ALBERTO CORTES VELAZQUEZ CLAUDIA GUADALUPE TORRES CALZADA ANDRES FELIPE DE JESUS QUIJANO RAMAYO RODOLFO MARTIN MEX ANGEL NEXTICAPAN GARCEZ DAISY DE LA CARIDAD PEREZ BRITO (2012)

Tomato (Lycopersicon esculentum) is an important vegetable crop in Mexico. Recently, a phytoplasma associated with leaf yellowing and curling, severe stunting and little leaf in tomato plant was identified as Yucatan tomato phytoplasma (16SrIII group). DNAs extracted from tomato leaves with symptoms were examined for the presence of this phytoplasma by nested polymerase chain reaction (PCR). Positive results were obtained in 44% of samples, yielding an rDNA product of 1.25 kb. In vitro and in silico restriction fragment length polymorphism (RFLP) patterns obtained with endonucleases HpaII, MseI, RsaI and TaqI were characteristics of group 16SrIII, according to the classification scheme of phytoplasmas. The pattern with AluI and HaeIII discriminated between these phytoplasmas and the members of 16SrIII group. Molecular characterization of the causal agent of Yucatan tomato phytoplasma will facilitate the study of this disease’s epidemic aspects and its phytosanitary management. In addition, it will contribute to a greater knowledge of the genetic diversity of phytoplasmas present in Mexico.

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DIAGNOSTICS PHYTOPLASMA 16S RDNA PCR-RFLP BIOLOGÍA Y QUÍMICA

Identificación molecular de heces y análisis de hábitos alimenticios de carnívoros en la reserva de la biósfera "Sierra del Abra Tanchipa", San Luis Potosí, México

HECTOR EDUARDO BENITEZ ALEMAN (2014)

Tesis (Maestría en Ciencias, especialista en Ganadería).- Colegio de Postgraduados, 2014.

La identificación precisa de heces de carnívoros silvestres es importante para describir sus hábitos alimenticios, sobre todo en aquellas especies elusivas o en riesgo. Sin embargo Identificar las heces de especies de carnívoros simpátricos no es una tarea sencilla. Por ello, las técnicas moleculares, son herramientas que brindan mayor precisión en la identificación de heces. El análisis de hábitos alimenticios aporta información valiosa para entender la estructura poblacional de los depredadores y sus presas, así como su importancia ecológica para generar estrategias de manejo y conservación de carnívoros y sus presas. Los objetivos de este estudio fueron identificar las heces de carnívoros extrayendo ADN mitocondrial de estas y amplificando un fragmento del gen citocromo b mediante un protocolo basado en la reacción en cadena de la polimerasa y polimorfismos en la longitud de los fragmentos de restricción (PCR-RFLP), así como analizar su contenido para la identificación de presas consumidas. Con el PCR-RFLP se identificaron 108 muestras de 125 recolectadas en campo, de ellas, 82 fueron de ocelote (Leopardus pardalis), 11 de zorra gris (Urocyon cinereoargenteus), 6 de puma (Puma concolor), 6 de jaguarundi (Puma yagouaroundi) y 3 de margay (Leopardus wiedii) respectivamente. En general, las especies presa consumidas fueron mamíferos menores a 2 kg. Las presas más importantes para el ocelote fueron el conejo (Sylvilagus floridanus), para el puma el venado cola blanca (Odocoileus virginianus). El índice estandarizado de la amplitud del nicho de Levins, indicó que el tigrillo fue el consumidor más especializado, mientras que el índice de Pianka identificó que el ocelote y la zorra gris presentaron el mayor solapamiento (0.78) compartiendo notablemente su preferencia por el conejo. Este trabajo es el primero realizado para identificar la dieta de pequeños carnívoros en la RBSAT y servirá como base para generar estrategias de conservación y manejo de estos carnívoros. _______________ MOLECULAR IDENTIFICATION OF FECES AND ANALYSIS OF CARNIVORE FOOD HABITS IN "SIERRA DEL ABRA TANCHIPA” BIOSPHERE RESERVE, SAN LUIS POTOSI, MEXICO. ABSTRACT: Accurate identification of feces of wild carnivores is important to describe their food habits, especially those at risk or elusive species. However, morphometric identification of feces like those of sympatric carnivores is not easy. Therefore, molecular techniques are tools that provide greater accuracy in identifying stool. Analysis of food habits provides valuable information to understand the population structure of predators and prey, as well as its ecological importance to develop management and conservation strategies of carnivores and their prey. The objectives of this study were to identify the feces of carnivores extracting mitochondrial DNA and amplifying a fragment of the cytochrome b gene using a protocol based in the polymerase chain reaction and restriction fragment length polymorphism (PCR- RFLP) and analysis content for the identification of prey consumed. With the PCR-RFLP, we identified 108 of 125 scats collected in the study area, of which, 82 were of ocelot (Leopardus pardalis), 11 of gray fox (Urocyon cinereoargenteus), 6 of puma (Puma concolor), 6 of jaguarundi (Puma yagouaroundi), and 3 of margay (Leopardus wiedii), respectively. In general, the most common prey mammals consumed were lower than 2 kg. The most important prey for ocelot was the rabbit (Sylvilagus floridanus), and white-tailed deer for puma (Odocoileus virginianus). The standardized index of niche breadth of Levins results suggest that the ocelot was a specialist consumer, whilst the index of Pianka identified that the ocelot and the gray fox showed the higher overlap (0.78) markedly sharing their preference for rabbit. This work is the first study to identify the diet of small carnivores in RBSAT and serve as the basis for generating conservation strategies and management of these carnivores.

Master thesis

ADN mitocrondrial Citocromo b PCR-RFLP Hábitos alimenticios Carnívoros Mitochondrial DNA Cytochrome b Food habits Carnivores Ganadería Maestría CIENCIAS AGROPECUARIAS Y BIOTECNOLOGÍA

Estandarización de técnicas de extracción de ADN en sementales porcinos para evaluar la frecuencia de los genes ESR y PLRL con PCR-RFLP

EVA DOLORES RAMOS (2007)

Tesis ( Maestría en Ciencias, especialista en Ganadería).- Colegio de Postgraduados, 2007.

Con el objeto de estandarizar y perfeccionar una técnica de extracción y purificación

de ADN a partir de sangre, semen y pelo de porcinos, se obtuvieron muestras de

35 sementales de línea materna Yorkshire y Landrace, en los cuales se valoró la

frecuencia de los genes ESR y PRLR mediante PCR-RFLP. La extracción de ADN

a partir de sangre y semen únicamente se estandarizaron. El pelo de sementales

fue la mejor opción para obtener una alta cantidad y calidad de ADN. Se identificó la

frecuencia de dos genes relacionados con prolificidad: Receptor de Prolactina

(PRLR) y Receptor de Estrógeno (ESR); en su amplificación se utilizó PCR-RFLP´s

y se identificaron los genotipos. En esta identificación se utilizó la enzima Alu I para

PRLR y Pvu II para ESR. Los resultados obtenidos, con la muestra de sementales,

mostraron que los genotipos asociados a los genes PRLR y ESR no se encontraron

en equilibrio Hardy-Weinberg (2, p<0.05). El alelo favorable B de los genes ESR y

el favorable A de PRLR mostró frecuencias de 0.14 y 0.21, respectivamente. No

ocurrieron animales homocigotos para el genotipo BB en el gen ESR. No hubo

diferencias (p>0.05) entre los genotipos asociados con el receptor de la prolactina y

el receptor de estrógeno en las características de prolificidad de las piaras,

consecuencia probablemente del reducido número de sementales muestreado._______In order to standardizing and perfecting a technique of extraction and DNA

purification from blood, semen and hair of pigs, samples of 35 sires of Yorkshire and

Landrace maternal lines were obtained, and the frequency of the genes ESR and

PRLR were valued using PCR-RFLP. The DNA extraction from just blood and

semen were standardized. The hair of the boars technique was the best option to

extract and to purify DNA, giving as a result a high amount of quantity and quality.

Once extracted the hair DNA the identification of the frequency of two genes related

to prolificacy came next: Receptor of Prolactine (PRLR) and Estrogen Receptor

(ESR). For the amplification of these genes PCR-RFLP´s was used and the

genotypes were identified. In this identification the enzyme Alu I for PRLR and Pvu II

for ESR were used. The obtained results, with the sample of boars, showed that the

genotypes associated to genes PRLR and ESR were not in Hardy-Weinberg

balance (2, p<0.05). The allele favourable B of the ESR and the allele A of the

PRLR genes showed frequencies of 0.14 and 0.21, respectively. Homozygote

animals for genotype BB in gene ESR did not happen. There were no differences

(p> 0.05) between the genotypes associated with prolificacy, the pig estrogen

receptor and the pig prolactin receptor, consequence probably of the reduced

sampling number of boars.

Master thesis

ADN pelo sangre semen cerdos PCR-RFLP CIENCIAS AGROPECUARIAS Y BIOTECNOLOGÍA

Detección de salmonella spp. mediante PCR en periplaneta americana linneo de la zona urbana en Torreón, Coahuila, México

SARAI MONSERRAT CUETO MEDINA (2013)

"Se colectaron 400 cucarachas (100 por cada hábitat) en los sistemas de alcantarillado dentro y a los alrededores de hospitales, escuelas, restaurantes y casas habitación del área urbana de Torreón, Coahuila, México para determinar la presencia de Salmonella sp. en el tracto digestivo de Periplaneta americana L., considerando que las cucarachas actúan como reservorios y transmisores mecánicos de hongos, helmintos, protozoarios, además de bacterias como Salmonella sp. Las cucarachas fueron diseccionadas para obtener el tracto digestivo, a partir del cual se extrajo ADN con la técnica CTAB y se sometieron a la PCR para amplificar el gen invA de Salmonella sp., con un tamaño de 287 pb. En general, los resultados mostraron una frecuencia baja de la bacteria en comparación con lo esperado, lo que comprueba que no todas las cucarachas portan la bacteria en el tracto digestivo. La ix frecuencia de cucarachas positivas a Salmonella sp. fue mayor en las colectadas en casas habitación (P<0.01) que en hospitales, restaurantes y escuelas. De acuerdo a los polimorfismos de longitud en los fragmento de restricción (RFLP) basado en el PCR del gen fliC, para determinar el serotipo de la Salmonella sp. presente en el tracto digestivo de las cucarachas, los resultados mostraron que Salmonella enteritidis fue el único serotipo encontrado en los ambientes de hospitales, escuelas y casas habitación."

"Specimens of Periplaneta americana L. (n=400) were collected from sewage systems in around hospitals, schools, restaurants and houses (100 for each environment) in the urban area of Torreon, Coahuila, Mexico to determine the frequency of Salmonella sp. in the digestive tract of cockroaches, since they act as reservoirs and mechanical vectors of fungi, helminthes, protozoa, as well as bacteria such as Salmonella sp. Cockroaches were dissected to obtain their digestive tract, from which DNA was extracted according to CTAB techniques and were run in PCR to amplify Salmonella sp. invA gene, 287 pb. In general, results showed a low frequency of the bacteria in comparison whit results expected, which shows that not all cockroaches carry the bacteria in the digestive tract. Salmonella sp. positive frequency was greatest in cockroaches collected from houses (P< 0.01) than those from hospitals, restaurants and schools. Results showed that Salmonella enteritidis was the only serotype found in hospitals, schools, restaurants and house environments, according to fliC gene and restriction fragment longitude polymorphism xi (RFLP) used to determine Salmonella serotype present in the digestive tract of de cockroaches."

Master thesis

Salmonella Cucarachas PCR PCR-RFLP Serotipo CIENCIAS AGROPECUARIAS Y BIOTECNOLOGÍA

Detección molecular de fitoplasmas en nopal tunero (Opuntia ficus-indica) con síntomas de engrosamiento del cladodio

Molecular detection of phytoplasmas in prickly pear (Opuntia ficus-indica) with thickening of the cladodio

ALBA PRISCILIA SUASTE DZUL REYNA ISABEL ROJAS MARTINEZ EMMA ZAVALETA MEJIA Daisy de la Caridad Pérez Brito (2012)

Durante 2010 se detectaron en la zona tunera de Nopaltepec, Estado de México, plantas de nopal con síntomas de deformación y engrosamiento del cladodio, mosaico, amarillamiento, proliferación y deformación de frutos en toda la planta o en parte de ella. Dado que el síndrome se ha relacionado con la infección por fitoplasmas, el objetivo de esta investigación fue detectar mediante la Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR), la presencia de fitoplasmas en diferentes estratos del cladodio y raíz de plantas de nopal. El ADN extraído de las muestras de plantas con síntomas y asintomáticas, se amplificó primero con los iniciadores universales P1/P7 y P1/Tint, y posteriormente mediante PCR anidada utilizando los iniciadores R16F2/R16R2, se obtuvo un fragmento de 1 200 pb en todas las muestras con los síntomas antes mencionados. El análisis de los patrones de restricción generados con las endonucleasas HaeIII, KpnI y MseI (TrU91), reveló que el fitoplasma pertenece al grupo 16SrXIII-Mexican periwinkle virescence.

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MOLLICUTES PCR ANIDADA RFLP-PCR GEN 16S RRNA BIOLOGÍA Y QUÍMICA BIOLOGÍA Y QUÍMICA

Variantes alélicas del gen de la Kappa-Caseína en ganado criollo lechero tropical

AMADO ALBERTO ÁLVAREZ CEPEDA (2014)

Tesis (Maestría en Ciencias, especialista en Ganadería).- Colegio de Postgraduados, 2014.

Las variantes A y B del gen de la κ-caseína influyen en la producción y composición de la leche y sus derivados. La variante B está relacionada con un mayor rendimiento de la cuajada. El objetivo de este estudio fue determinar las frecuencias genotípicas y alélicas de las variantes A y B del gen de la κ-caseína en la población de hembras Criollo Lechero Tropical y su relación con la composición química de la leche. Se recolectaron muestras de sangre de la vena coccígea de las hembras utilizando tubos Vacutainer de 5 ml adicionados con el anticoagulante EDTA. La extracción de ADN y la amplificación y digestión del gen, se realizó bajo condiciones de laboratorio. Se utilizó la técnica de Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) para amplificar el gen de la κ-caseína y la técnica de Polimorfismos en el Tamaño de los Fragmentos de Restricción (RFLP) para la detección de fragmentos de Ácido Desoxirribonucleico (ADN) de distinto peso molecular. Las frecuencias genotípicas estimadas fueron .09, .60 y .31 para los genotipos AA, AB y BB (p≤0.05). Las frecuencias alélicas fueron .39 y .61 para los genes A y B (p≤0.05). No se encontró efecto significativo del genotipo de la κ-caseína en la producción y composición de la leche de vacas (CLT). La mayor frecuencia génica de la variante B, comparada con algunas razas lecheras europeas e indicas, sugiere realizar estudios conjuntos con genotipos de variantes alélicas de otros genes relacionados con la composición de la leche. _______________ ALLELIC VARIANTS OF THE KAPPA CASEIN GENE IN CREOLE TROPICAL DAIRY CATTLE. ABSTRACT: Variants A and B of the κ–casein gene influence the production and composition of milk and dairy products. Variant B is associated with an increased yield of curd. The aim of this study was to determine the genotype and allele frequencies of variants A and B of the κ–casein gene in the Tropical Milking Criollo female population and its relation to the chemical composition of milk. Blood samples were collected from the females´ coccygeal vein using 5 ml Vacutainer tubes added with EDTA anticoagulant. DNA extraction, amplification and digestion of the gene were performed under laboratory conditions. The Chain Reaction Technique of Polymerase (PCR) was used to amplify the κ–casein gene and the Polymorphisms Technique in the Size of the Restriction Fragments (RFLP ) to detect fragments of Deoxyribonucleic Acid (DNA ) of different molecular weight . The estimated genotype frequencies were .09, .60 and .31 for the genotypes AA, AB and BB (p ≤ 0.05). The allele frequencies were .39 and .61 for genes A and B (p ≤ 0.05). No significant effect was found of the κ–casein genotype on the production and composition of milk from cows (CLT). The greater gene frequency of variant B, compared to some European and Indic dairy breeds, suggests to perform joint studies with genotypes of allelic variants of other genes related to the composition of milk.

Master thesis

Criollo Lechero Tropical PCR RFLP K-caseína Tropical Milking Creole K-casein Ganadería Maestría CIENCIAS AGROPECUARIAS Y BIOTECNOLOGÍA

‘Candidatus Phytoplasma trifolii' (16SrVI) en chile mirasol (Capsicum annuun L.) cultivado en Zacatecas, México

‘Candidatus Phytoplasma trifolii' (16SrVI) in mirasol chili pepper (Capsicum annuun L.) cultivated in Zacatecas, México

JORGE ARMANDO MAURICIO CASTILLO SILVIA SALAS MUÑOZ RODOLFO VELASQUEZ VALLE Salvador Ambriz LUIS ROBERTO REVELES TORRES (2015)

"Plantas de chile (Capsicum annuum L.) para secado tipo Mirasol que mostraban síntomas de yema grande, amarillamiento y enrollamiento foliar, fueron colectadas en parcelas comerciales en el municipio de Calera de Víctor Rosales, Zacatecas, México. Se analizaron mediante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) anidada para determinar la presencia de fitoplasmas, con el par de oligonucleótidos universales P1/Tint, seguido del par R16F2n/R16R2, y del análisis de fragmentos del ADNr 16S mediante la obtención de bandas polimórficas a partir de patrones de restricción (RFLP). La presencia de dos patrones de restricción diferentes indicó la existencia de dos nuevas cepas de ‘Candidatus Phytoplasma trifolii', grupo 16SrVI. La primera secuencia de fitoplasma (ChZac4F3) correspondió al subgrupo 16SrVI-A; en cambio la segunda secuencia de fitoplasma (ChZac5F1) se clasificó dentro de un nuevo subgrupo (16SrVI-J). Ambas secuencias mostraron una similitud de 99.2 y 99.1 %, respectivamente, al ser comparadas con la cepa de referencia de ‘Candidatus Phytoplasma trifolii' (AY390261) al analizarlas con el programa iPhyClassifier. Este es el primer reporte de dos nuevas cepas de ‘Candidatus Phytoplasma trifolii' asociadas con la sintomatología de yema grande, amarillamiento y enrollamiento foliar en chile Mirasol en Zacatecas, México."

"Dry chili pepper Mirasol type plants (Capsicum annuum L.) exhibiting foliar yellowing, big bud, and rolled-up margins symptoms were collected from commercial pepper fields in Calera de Victor Rosales country, Zacatecas, México. They were examined to determine the presence of phytoplasms by nested polymerase chain reaction (PCR) using the universal primer pair P1/Tint, followed by the primer pair R16F2n/R16R2 and restriction fragment length polymorfism (RFLP) analysis of 16S rDNA sequences. The presence of two different RFPL patterns in clones from different samples indicated the presence of two phytoplasmas isolates. Each was classified as strains of ‘Candidatus Phytoplasma trifolii', that belong to group 16SrVI. The first ChZac4F3 phytoplasma sequence belongs to subgroup 16SrVI-A, while the second ChZac5F1 phytoplasma sequence was classified into a new subgroup (16SrVI-J). ChZac4F3 and ChZac5F1 phytoplasma sequences showed a similarity of 99.2 and 99.1 %, respectively, with the reference strain of ‘Candidatus Phytoplasma trifolii' (AY390261), when both were analyzed via the iPhyClassifier program. This is the first report of two new strains of ‘Candidatus Phytoplasma trifolii' associated to foliar yellowing, big bud and rolled-up margins symptoms in Mirasol chili pepper in Zacatecas, México."

Article

‘Candidatus Phytoplasma trifolii' Capsicum annuum Diagnóstico molecular PCR CIENCIAS AGROPECUARIAS Y BIOTECNOLOGÍA

A simple and efficient method for isolation of DNA in high mucilaginous plant tissues

ILEANA DE LA CARIDAD ECHEVARRIA MACHADO LUCILA AURELIA SANCHEZ CACH CECILIA HERNANDEZ ZEPEDA RENATA LOURDES BARBARA RIVERA MADRID OSCAR ALBERTO MORENO VALENZUELA (2005)

A protocol is described for rapid DNA isolation from Malvaceae plant species and different tissues of Bixaceae that contain large amounts of polysaccharides, polyphenols, and pigments that interfere with DNA extractions. The method is a modification of Dellaporta et al. The current protocol is simple, and no phenolchloroform extraction, ethanol, or isopropranol precipitation is required. The method is based in the incubation of soluble DNA with silica, mix in batch during the extraction. The procedure can be completed in 2 h and many samples can be processed at the same time. DNA of excellent quality was recovered and used for polymerase chain reaction (PCR) amplification, restriction enzyme digestion, and Southern blot analysis. The method was used with healthy Bixa orellana and virus-infected Malvaceae plants. 

Article

BIXA ORELLANA DNA EXTRACTION MALVACEAE PCR BIOLOGÍA Y QUÍMICA CIENCIAS DE LA VIDA

Standardization of PCR technique for detecting Listeria monocytogenes in chicken, beef and pork

ASAEL EDEM DE LA ROSA ZARIÑANA MARTA ELVA RAMIREZ GUZMAN DAVID HERNANDEZ SANCHEZ MIGUEL ANGEL MATA ESPINOSA (2017)

El objetivo fue estandarizar la técnica de PCR para el diagnóstico de Listeria monocytogenes en carne de

pollo, res y cerdo. Se evaluó la sensibilidad y especi cidad de la PCR y el nivel de concordancia con el método microbiol

ógico. La PCR se estandarizó utilizando un total de 60 muestras de carne de pollo, res y cerdo, (20 muestras por

tipo de carne).

The aim of this study was to standardize the PCR technique for detecting Listeria monocytogenes (Lm)

in chicken, beef and pork. The sensitivity and speci city of PCR and the level of concordance with the microbiological

method were evaluated. PCR was standardized using a total of 60 samples of chicken, beef and pork (20 samples

per meat type.) Sensitivity and speci city were calculated using the 2 x 2 table and the level of accordance by the

Kappa index. The minimum detectable DNA concentration was 3.0 ng L1. The PCR showed 100% sensitivity and

speci city, and 80, 91 and 100% concordance between the methods was obtained for detecting Lm in chicken, beef

and pork samples respectively, with 89.4% similarity between the methods for the three types of meat.

Article

CIENCIAS AGROPECUARIAS Y BIOTECNOLOGÍA Listeria monocytogenes PCR meat validation sensitivity Bayes' Theorem Kappa index

Detección de Neospora caninum mediante PCR en sangre y su asociación con la producción láctea en bovinos

RAUL MIGUEL REYES SANDOVAL (2016)

Neospora caninum es un protozoario perteneciente al Phylum Apicomplexa, es el agente causal de la neosporosis bovina, enfermedad considerada actualmente como la principal causa de aborto bovino alrededor del mundo, esta enfermedad además de producir abortos genera disminución en la producción láctea, y en los parámetros productivos y reproductivos. El objetivo de la presente investigación fue detectar a Neospora caninum mediante PCR en sangre y asociar el serostatus frente al parásito con la producción láctea en bovinos de un hato perteneciente al SPLPE del municipio de Amecameca, Estado de México. Se estableció el estado serológico frente al parásito mediante ELISA al inicio del estudio y se registró la producción láctea de las hembras en producción semanalmente durante 36 meses para posteriormente comparar la exposición a Neospora caninum y determinar la asociación con la producción de leche. Por otra parte, se realizaron cinco muestreos de manera mensual y se colectaron muestras sanguíneas de la vena caudal por medio de tubos al vacío con anticoagulante para la obtención glóbulos blancos con la finalidad de determinar la presencia del parásito utilizando la técnica de PCR anidado con iniciadores previamente publicados, adicionalmente, fueron analizados tejidos fetales con el mismo protocolo; fueron secuenciados amplicones obtenidos y comparados con los reportado en el Genbank; finalmente, se calculó la concordancia entre las pruebas ELISA y PCR. De 37 vacas en las que se registró la lactancia completa, el 27 % fue seropositivo en un estudio previo; estimando un promedio de producción de 3,755.1 Kg. de leche por lactancia para el grupo de vacas seropositivas y de 4,390.9 Kg para las vacas seronegativas lo que representó 12.31 y 14.39 kg de leche/vaca/día; el valor de la producción de leche fue de $22,530.00 pesos por lactancia para las vacas seropositivas y $26,345.40 pesos para las seronegativas. Se estimó una seroprevalencia del 81.8 % a Neospora caninum en el hato por medio de ELISA; por su parte, el porcentaje de animales positivos al parásito mediante la prueba de PCR anidado fueron de 55.8, 94.1, 100, 97.1, 100 para los meses uno al cinco, respectivamente, promediando 89.4 % en el periodo estudiado. Con respecto al tiempo de gestación, fueron positivas 13, 16, 15, 13, 14, 13, 11, 10, 6 vacas desde el primero al noveno mes respectivamente; también, resultaron positivas 41 vacas no preñadas (nueve recién paridas), siendo de 88.0, 88.9, 87.9 % las prevalencias por cada tercio de gestación. Hubo un 91-96 % de homología en las secuencias de los amplicones respecto a lo publicado. El índice Kappa fue de K= 0.41 entre ELISA y PCR. Se concluye que las vacas seropositivas a Neospora caninum de un hato perteneciente al sistema de producción de leche en pequeña escala del municipio de Amecameca producen menor cantidad de leche que las vacas seronegativas; por otra parte, se demostró la presencia de Neospora caninum mediante PCR anidado.

Master thesis

leucocitos remove selected pcr neospora caninum CIENCIAS AGROPECUARIAS Y BIOTECNOLOGÍA