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Factores que influyen en la formación de esporomas y micorrización de dos hongos comestibles ectomicorrízicos asociados con un pino neotropical

JUAN ALFONSO VILLEGAS OLIVERA (2014)

Tesis (Maestría en Ciencias, especialista en Edafología).- Colegio de Postgraduados, 2014.

Actualmente, la utilización de hongos ectomicorrízicos, particularmente de especies comestibles, ha cobrado una enorme importancia a la producción de árboles forestales. Sin embargo, los factores que influyen en la formación de esporomas de hongos ectomicorrízicos comestibles no son conocidos completamente. En el presente trabajo se evaluó el efecto de dos filtros de luz, amarillo y rojo, en la formación de dos especies de hongos ectomicorrízicos comestibles, asociados con dos pinos Neotropicales. El germoplasma fúngico estudiado procedió de la Sierra Nevada, México. Se registró mayor formación de esporomas de Hebeloma leucosarx, cuando las plantas estuvieron expuestas al filtro amarillo en comparación con plantas expuestas al filtro rojo, en P. montezumae y P. greggii. En el caso de L. bicolor se registró mayor formación de esporomas cuando las plantas estuvieron expuestas al filtro rojo. Además se describe detalladamente la ontogenia de Laccaria bicolor y Hebeloma leucosarx. Hasta donde conocemos esta es la primera ocasión que se registra la influencia de la calidad de luz en la formación de esporomas de hongos comestibles ectomicorrízicos. Cuando se inocularon árboles con Laccaria laccata y Hebeloma mesophaeum, se registraron altos porcentajes de micorrización, mayores a 90%, en ambas especies de pinos. Al trasplantar árboles inoculados con estos hongos de contenedores de 140 cm3 a contenedores de 6kg de capacidad, se mantuvieron estos altos porcentajes de micorrización. Este trabajo demuestra que la inoculación con Hebeloma spp. y Laccaria spp., tiene gran potencial de uso en la producción de plantas de P. greggii y P. montezumae en invernadero. _______________ FACTORS AFFECTING THE FORMATION OF SPOROMES AND MYCORRHIZATION OF TWO EDIBLE ECTOMYCORRHIZAL MUSHROOMS ASSOCIATED WITH A NEOTROPICAL PINE. ABSTRACT: Currently, the use of ectomycorrhizal fungi, particularly of edible species has gained immense importance in the production of forest trees. However, the factors influencing the formation of sporomes of edible ectomycorrhizal fungi are not known completely. In this work the effect of two filters light, yellow and red, in formation of sporomes of two species of edible ectomycorrhizal fungi associated with two pine Neotropical was evaluated. The studied fungal germoplasm came from the Sierra Nevada region, Mexico. A greater number of Hebeloma leucosarx sporomes was recorded when plants were exposed to the yellow filter compared to plants exposed to red filter, in P. greggii and P. montezumae. In the case of L. bicolor an increased formation of sporomes was recorded when plants were exposed to red filter. Also, it is described in detail the ontogeny of Laccaria bicolor and Hebeloma leucosarx. To our knowledge this is the first time that the influence of the quality of light is recorded in sporome formation of edible ectomycorrhizal mushrooms. When trees were inoculated with Laccaria laccata and Hebeloma mesophaeum, high percentages of mycorrhization, over 90% in both pine species, were recorded. When transplanting trees inoculated with these fungi, from containers with a capacity of 140 cm3 to 6 kg containers, these high percentages of mycorrhization were maintained. This work shows that the inoculation with Hebeloma spp. and Laccaria spp., has great potential for use in the production of plants of P. greggii and P. montezumae in greenhouse.

Master thesis

Inóculo esporal Píleos Hongos silvestres Spore inoculum Pilei Wild mushrooms Edafología Maestría CIENCIAS AGROPECUARIAS Y BIOTECNOLOGÍA

Leersia hexandra Sw, especies y colonización por micorrizas arbusculares: organismos indicadores de toxicidad y adaptación a petróleo fresco.

ALEJANDRO ALEJANDRO CORDOVA (2016)

Tesis (Maestría en Ciencias, especialista en Producción Agroalimentaria en el Trópico).- Colegio de Postgraduados, 2016.

Leersia hexandra y hongos micorrícicos arbusculares (HMA) habitan en suelos contaminados con petróleo de regiones petroleras del sureste de México, pero se desconoce el nivel de tolerancia al petróleo. Durante 180 días se evaluó un bioensayo en microtunel, se utilizó suelo superficial de un Gleysol donde se estableció el pasto L. hexandra para evaluar el potencial de HMA como indicadores de la toxicidad del petróleo crudo. Se probaron nueve tratamientos: un testigo [693 mg kg-1 hidrocarburos totales del petróleo (HTP's) biogénico] y ocho con petróleo crudo fresco mediano (3000, 10000, 30000, 60000, 90000, 120000, 150000 y 180000 mg kg-1 base seca). Se evaluó el efecto del petróleo en planta y en la colonización micorrícica. La biomasa seca foliar fue mayor estadísticamente en suelo con 3000 a 60000 mg kg-1 de petróleo, comparada con la biomasa del suelo testigo, pero la exposición a dosis mayores inhibió la biomasa vegetal. La materia seca radical fue mayor a mayor concentración de petróleo, el efecto fitotóxico ocurrió en suelo con 180000 mg kg-1 de petróleo. La colonización radical por hifas, vesículas, arbúsculos y esporas fue estimulada hasta por 60000 mg kg-1 petróleo, pero a partir de 90000 mg kg-1 fue inhibida. Los HMA en suelos a partir de 90000 mg kg-1 mostraron índices de micotoxicidad menores a uno. Se identificaron nueve morfoespecies de hongos micorrícicos. Las morfoespecies con índices de toxicidad menores a uno, expuestas a 30000 a 180000 mg kg-1 de petróleo, fueron Ambispora aff. gerdemannii, Claroideoglomus lamellosum, Diversispora eburnea, Funneliformis aff. geosporum, Rhizophagus clarus, R. fascilulatus y R. intraradices y son sensibles al petróleo, pueden ser utilizados como bioindicadores de la contaminación del suelo con petróleo. Diversispora sp. fué estimulada por el petróleo, por lo que se propone para usos en restauración ecológica mediante fitorremediación utilizando a L. hexandra. _______________ Leersia hexandra Sw., SPECIES AND COLONIZATION BY MYCHORRIZAE ARBUSCULAR: ORGANISMS INDICATORS OF TOXICITY AND ADAPTATIÓN TO FRESH OIL. ABSTRACT: Leersia hexandra and arbuscular mycorrhizal fungi (AMF) inhabit soils contaminated with oil in the oil regions of southeastern Mexico, but their tolerance to oil is unknown.A bioassay was conducted in a microtunnel for 180 days, planting the grass L. hexandra on superficial soil from a Gleysol to evaluate the potential of AMF as indicators of the toxicity of crude oil. Nine treatments were tested; a control (693 mg kg-1 HTP´s biogenic) and eight included fresh medium crude oil (3000, 10000, 30000, 60000, 90000, 120000, 150000 and 180000 mg kg-1 dry basis). We evaluated the effect of oil on plants and on mycorrhizal colonization. The leaf dry biomass was statistically higher in soil with 3000-60000 mg kg-1 of oil compared to the biomass of the control soil, but exposure to higher doses inhibited plant biomass production. Root dry matter was greater with higher oil concentrations; the phytotoxic effect occurred in soil with 180000 mg of oil. Root colonization by hyphae, vesicles, arbuscules and spores was stimulated by up to 60000 mg kg-1 of oil, but more than 90000 mg inhibited it. In soils with oil concentrations equal or higher than 9000 mg kg-1, AMF had mycotoxicity index values lower than one. Nine morphospecies of mycorrhizal fungi were identified. The morphospecies that were exposed to 30000 to 180000 mg kg-1 of oil and that showed toxicity values lower than one, were: Ambispora aff. gerdermanii, Claroideoglomus lamellosum, Diversispora eburnea, Funneliformis aff. geosporum, Rhizophagus clarus, R. fasciculatus and R. intraradices; these morphospecies are sensitive to oil and can be used as bio-indicators of soil pollution with oil. Oil stimulated the growth of Diversispora sp; thus, this fungi is proposed for ecological phytoremediation using L. hexandra.

Master thesis

Diversispora sp. Espora Toxicidad Micotoxicidad Pasto tropical Spore Toxicity Mycotoxicity Tropical grass Producción Agroalimentaria en el Trópico Maestría CIENCIAS FÍSICO MATEMÁTICAS Y CIENCIAS DE LA TIERRA CIENCIAS DE LA TIERRA Y DEL ESPACIO CIENCIAS DEL SUELO (EDAFOLOGÍA) QUÍMICA DE SUELOS

In Vitro Assessment of Fecal Inocula From Horses Fed on High-Fiber Diets With Fibrolytic Enzymes Addition on Gas, Methane, and Carbon Dioxide Productions as Indicators of Hindgut Activity

Ahmed E. Kholif LUIS ANGEL BAZA GARCIA MONA MOHAMED MOHAMED YASSEEN ELGHANDOUR ABDELFATTAH ZEIDAN MOHAMED SALEM ALBERTO BARBABOSA PLIEGO IGNACIO ARTURO DOMINGUEZ VARA JUAN EDREI SANCHEZ TORRES (2016)

The aim of this study was to assess the effect of fecal inocula from horses fed on concentrate (restricted amount daily) and oat straw (ad libitum) supplemented with fibrolytic enzymes on in vitro hindgut activity. Cellulase (CE), xylanase (XY), and CE þ XY (1:1 vol/vol; CX) were tested at three levels (mL/g dry matter [DM]): 0, 1, and 3, in addition to control without enzyme addition. Fecal inocula were collected from 16 Quarter Horse mares supplemented with enzyme at 0 (without enzyme), or fed 5-mL enzyme/mare/d of CE (FCE), XY (FXY), or CE þ XY (1:1 vol/vol; FCX) for 15 days. The fecal content mixed with the culture media were used for incubation in bottles containing 1-g DM of substrate (a mixture of concentrate and oat straw [1:1 DM]). Gas (GP), methane (CH4), and carbon dioxide productions were measured at 2, 4, 6, 8, 10, 12, 24, and 48 hours after incubation. Interactions occurred (P < .05) between fecal source enzyme product for the asymptotic GP, the rate of GP, CH4 production, and fermentation kinetic parameters. Moreover, interactions were observed (P < .05) between fecal source enzyme product enzyme dose for the rate of GP, CH4 production, and DM digestibility. Xylanase at 3-mL/g DM with FXY fecal increased (P < .05) the asymptotic GP, short-chain fatty acids, and microbial protein productions with lowering (P < .05) partitioning factor. At 24 and 48 hours and without enzyme, FCX and FXY, had the highest (P < .05) CH4 production. It can be concluded that XY enzyme at 3-mL/g DM was the most effective compared with other treatments.

Article

fibrolytic enzymes fecal inoculum in vitro gas production methane production CIENCIAS AGROPECUARIAS Y BIOTECNOLOGÍA

Effect of Partial Replacement of Steam Rolled Corn With Soybean Hulls or Prickly Pear Cactus in the Horse’s Diet in the Presence of Live Saccharomyces cerevisiae on In Vitro Fecal Gas Production

ALEJANDRO ESQUIVEL VELAZQUEZ Ahmed E. Kholif MONA MOHAMED MOHAMED YASSEEN ELGHANDOUR ABDELFATTAH ZEIDAN MOHAMED SALEM ROBERTO MONTES DE OCA JIMENEZ ALBERTO BARBABOSA PLIEGO NICHOLAS ODONGO JOSE LUIS BORQUEZ GASTELUM MOISES CIPRIANO SALAZAR JAIME OLIVARES PEREZ (2016)

Grains represent important sources of energy to horses. Feeding diets with high-grain contents is associated withsome feeding disorders and less feed utilization [1] due tomicrobial profile disturbance [2] and impaired fibrolytic activity in the hindgut [3]. Therefore, partial replacement of grains (energy sources) with other feeds, rich in fibers, would appear to be a good alternative solution to prevent such problems and increase feed utilization and reduce feeding costs.

The aim of the study was to evaluate the fecal fermentation of partial replacing steam rolled corn with soybean hulls (SH) or prickly pear cactus (PC) as energy source in horse diets, in the presence of Saccharomyces cerevisiae. Steam rolled corn was replaced with SH at 0% (control), 7.5% (SH75), and 15% (SH150) in the first trial, whereas it was replaced with PC at 0% (control; the same of the first trial), 7.5% (PC75), and 15% (PC150) in the second trial. Yeast of S. cerevisiae was added at 0, 2, and 4 mg/g dry matter (DM) of incubated substrates. Fecal inoculum was obtained from four adult English Thoroughbred horses fed on an amount of commercial concentrate and oat hay ad libitum. Interactions observed between PC rations and yeast doses for the asymptotic gas production (GP), the rate of GP and carbon dioxide (CO2) production during some incubation hours. Moreover, with no effect due to SH rations (P > .05), increased (P < .05) rate of GP was observed with the ration PC75 compared with other rations. Besides, PC75 and PC150 rations with 0 mg yeast/g DM linearly decreased (P < .05) CO2 production at some incubation hours. However, SH75 and SH150 ration had increased (P ¼ .005) DM degradability (DMD). Yeast addition at 2 mg/g DM increased the asymptotic GP (P ¼ .048) with the SH75 and PC150 rations. The level of 4 mg yeast/g DM increased the asymptotic GP (P ¼.048) from the SH150 ration. Yeast addition at 2 and 4 mg/g DM increased (P < .05) the asymptotic GP from PC75 and PC150 rations, respectively, with increasing DMD with the both doses. Yeast addition increased (P <.05) CO2 production from SH75, SH150, PC75, and PC150 rations. It could be concluded that SH and PC can replace steam rolled corn at levels of 7.5% to 15% without negative effect of fermentation kinetics and with better fermentation performance in the presence of yeast at 2 mg/g DM of substrates.

Article

cactus energy feed fecal inoculum gas production soybean hulls yeast CIENCIAS AGROPECUARIAS Y BIOTECNOLOGÍA

Micorriza arbuscular y bacterias promotoras del crecimiento en chile (Capsicum annuum L): desde plántula hasta calidad postcosecha.

LUCIO LEOS ESCOBEDO (2016)

Tesis (Doctorado en Ciencias, especialista en Fruticultura).- Colegio de Postgraduados, 2016.

La producción agrícola depende de factores como clima, suelo, agua y microorganismos rizosféricos. Algunos de estos son benéficos como los hongos micorrízicos arbusculares (HMA) y las rizobacterias promotoras del crecimiento vegetal (Rpcv). En un primer experimento se determinó la germinación in vitro de esporas de HMA asociados a Rpcv. Las cepas bacterianas evaluadas promovieron la germinación de las esporas de HMA en condiciones in vitro hasta 60%, mientras que sin Rpcv fue 11.66%.En un segundo experimento en invernadero se evaluó el crecimiento y los daños causados por zoosporas de Phytophthora capsici en plantas inoculadas con HMA y HMA más Rpcv. El porcentaje de colonización micorrízica fue mayor en el tratamiento de HMA+Rpcv con respecto al tratamiento solo con HMA. La altura, el diámetro de tallo, el peso seco de planta y el volumen radical fueron mayores con la inoculación de HMA+Rpcv en comparación con la inoculación de HMA y el testigo sin inoculación. En la resistencia de plantas al ataque de P. capsici, se encontró que a los 84 ddt el tratamiento de inoculación HMA+Rpcv, presentó 4.84% de plantas muertas, HMA 11.21% y el testigo 14.24%. En un tercer experimento se evaluó la promoción de crecimiento, producción de frutos y calidad postcosecha por HMA y/o Rpcv en tres genotipos de chile destacados en el experimento previo. A su vez, se separaron los efectos de la inoculación con HMA de aquellos derivados de los nutrimentos presentes en el mismo inoculante pero esterilizado. La inoculación con HMA provocó mayor producción de frutos en Pasilla y Guajillo, frutos que pierden menos humedad en Pasilla y que pierden más humedad en Ancho; además, frutos más blandos en Pasilla y Ancho. La inoculación con Rpcv promovió la producción de frutos en Pasilla y Guajillo y tonos más claros en la maduración de los tres genotipos. La co-inoculación produjo chiles más ácidos en el genotipo Ancho. Se diferenciaron los efectos de la inoculación con HMA de los derivados del aporte de nutrimentos en el inoculante esterilizado en producción de frutos de los tres genotipos. _______________ ARBUSCULAR MYCORRHIZAE AND GROWTH-PROMOTING BACTERIA IN PEPPER (Capsicum annuum L.): FROM SEEDLING TO POSTHARVEST QUALITY. ABSTRACT: Agricultural production depends on factors like weather, soil, water, and rhizosphere microorganisms. Some of these last are beneficial, like arbuscular mycorrhizal fungi (AMF) and rhizobacteria that promote plant growth (Rppg). First trial consisted in determining the in vitro germination of AMF spores associated with Rppg. Bacterial strains promote in vitro germination of spores up to 60%, while spore germination without Rppg was 11.66%. A second experiment in greenhouse were also evaluated growth and damage caused by zoospores of Phytophthora capsici in pepper plants inoculated with AMF and AMF+Rppg. The percentage of mycorrhizal colonization was greater with the AMF+Rppg treatment than with the AMF treatment alone. Plant height, stem diameter, dry weight, and radical volume were all greater with the inoculation with AMF+Rppg as compared to the AMF inoculation and the control treatment with no inoculation. With regard to plant resistance to attack by P. capsici, after 84 d the AMF+Rppg inoculation treatment had 4.84% dead plants, AMF had 11.21%, and the control treatment had 14.24%. In a third experiment, growth promotion, fruits production and its postharvest quality were evaluated on three pepper genotypes inoculated with HMA and/or Rppg. Although, effects associated with HMA activity against those associated with nutrient addition by autoclaved-inoculum were recognized. HMA inoculation promote fruits production and softer fruits on Pasilla and Ancho genotypes. Rppg inoculation promote fruits production and lighter external color on all genotypes. Double inoculation produce more acid fruits on Ancho genotype. Effects of HMA inoculation can differentiate from those associated with nutrient supply by the autoclaved inoculum.

Doctoral thesis

Germinación de esporas Biofertilizantes Genotipos Phytophthora capsici Spore germination Biofertilizers Genotypes Fruticultura Doctorado CIENCIAS AGROPECUARIAS Y BIOTECNOLOGÍA CIENCIAS AGRARIAS AGRONOMÍA PRODUCCIÓN DE CULTIVOS

Distribución de la carga de inóculo regional de Candidatus Liberibacter asiaticus en Diaphorina citri en tres escenarios cítricolas de México.

ALEJANDRA DE LA ROSA ANAYA (2016)

Tesis (Maestría en Ciencias, especialista en Fitopatología).- Colegio de Postgraduados, 2016.

A siete años de la detección del Huanglongbing (HLB) de los cítricos en México, enfermedad causada por la bacteria Candidatus Liberibacter asiaticus (CLas), se han definido tres escenarios epidémicos regionales con diferente intensidad. El presente trabajo analizó la disponibilidad de inóculo en planta y su relación con la carga bacteriana en el vector, Diaphorina citri (Dc) (Hemyptera: Liviidae), con el fin estudiar el efecto de carga de inóculo en los procesos epidémicos regionales. En esta investigación se colectaron 665 muestras compuestas de Dc para un total de 6650 especímenes procesados, 4433 muestras compuestas de tejido vegetal obtenidas del mismo número de árboles distribuidas en 215 huertas de tres regiones citrícolas: Pacífico (Colima y Michoacán), Centro-Golfo (Puebla y Veracruz) y Península de Yucatán (Campeche, Quintana Roo y Yucatán). La presencia y cuantificación de CLas se realizó mediante la reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (qPCR) mediante los iniciadores HLBp (5´-TCG AGC GCG TAT GCA ATA CG-3´), HLBr (5'-GCG TTA TCC CGT AGA AAA AGG TAG-3´), y la sonda (5´- AGA CGG GTG AGT AAC GCG-3´). En Colima y Michoacán, entidades con alta intensidad epidémica y con predominio de huertas comerciales de limón mexicano (Citrus aurantifolia), la concentración de CLas en vector fue muy alta con cargas máximas estimadas de 2.5X107 copias promedio por huerta. En Yucatán, tipificado por presencia de HLB en naranja (C. sinensis) y limón persa (C. latifolia) de traspatios urbanos y rurales, además de huertos comerciales, la carga máxima promedio fue de 5X106 copias. En Veracruz y Puebla, con predominancia de huertas de naranja y limón persa, la concentración fue más baja con 4X102 copias y 1X102, respectivamente. La concentración bacteriana de muestras colectadas en los estados con mayor intensidad epidémica se ajustaron a una versión modificada del modelo Weibull mediante el procedimiento PROC NLIN de SAS v.9.0 ®. La carga de inóculo de CLas en Dc en función de la concentración bacteriana en planta mostró una curva sigmoidal con una tasa promedio de carga de inóculo estadísticamente similar (p=0.05) entre Colima y Michoacán, con b-1= 13, 599,314 (r2=0.72) y b-1= 14, 883,248 (r2=0.87), respectivamente. En el resto de los estados, debido al bajo porcentaje de muestras positivas en Dc, no se observó una clara tendencia entre la relación inóculo vector:planta por lo que el modelo no se ajustó. A nivel parcelario, el patrón espacial de la concentración bacteriana en planta y vector fue analizado con mapas interpolativos geoestadísticos con Surfer ver.10®. En siete parcelas, el patrón asociado al vector mostró un comportamiento relacionado con el patrón espacial de la concentración de CLas en planta y con el nivel tecnológico de manejo. En Colima existió una mayor carga de inóculo en la periferia (4X106 copias) y menor en el interior (2X106 copias) en una huerta con manejo tecnológico bajo. Por el contrario, se registró menor carga de inóculo en la periferia (9X104 copias) y mayor en el centro (1X105 copias) en una huerta con manejo tecnológico alto, aunque en general la carga bacteriana fue menor respecto a la de baja tecnología. En Michoacán y Veracruz, donde CLas se encuentra bajo un proceso activo de dispersión, el patrón se caracterizó por exhibir un avance del borde hacia el interior de las huertas con concentraciones en Dc de 3x105 y 2x102 copias, y 1X105 y 1 X102 copias en las periferias y en el centro (resultados promedio de dos huertas), respectivamente. En Puebla las muestras de Dc fueron negativas por lo que no se conformó un patrón espacial. Este es el primer trabajo que estudia la relación de carga de inóculo de CLas en planta y vector a nivel regional, asimismo, se hace la propuesta de un umbral de adquisición de CLas por Dc en el rango de 2,694 y 13,900 copias del gen 16S ADNr en plantas de limón mexicano. _______________ DISTRIBUTION OF THE BURDEN INOCULUM REGIONAL OF Candidatus Liberibacter asiaticus INOCULUM Diaphorina citri IN THREE SCENARIOS OF CITRUS MEXICO. ABSTRACT: Seven years after the detection of Huanglongbing (HLB) of citrus in Mexico, a disease caused by the bacterium Candidatus Liberibacter asiaticus (CLAS), three regional epidemic scenarios had been defined with different intensity. This study analyzed the availability of inoculum in relation to the plant and bacterial load in the vector, Diaphorina citri (Dc) (Hemyptera: Liviidae), in order to study the effect of inoculum burden in regional epidemic processes. In this research, 665 composite samples of Dc were collected for a total of 6,650 processed specimens, 4,433 composite samples of plant tissue obtained from the same number of trees distributed in 215 citrus orchards from three regions: Pacific (Colima and Michoacan), Central Gulf (Puebla and Veracruz) and Peninsula of Yucatan (Campeche, Quintana Roo and Yucatan). The presence and quantification of CLAS was performed by polymerase chain reaction in real time (qPCR) using the primers HLBp HLBp (5´-TCG AGC GCG TAT GCA ATA CG-3´), HLBr (5'-GCG TTA TCC CGT AGA AAA AGG TAG-3´), and probe (5´- AGA CGG GTG AGT AAC GCG-3´). In Colima and Michoacan, entities with high epidemic intensity and predominance of commercial orchards of Mexican lemon (Citrus aurantifolia), the concentration of CLAS in the vector was very high with maximum loads of 2.5X107 average copies per orchard. In Yucatan, typified by the presence of HLB in orange (C. sinensis) and Persian lemon (C. latifolia) in urban and rural backyards as well as commercial orchards, the average peak of load was 5x106 copies. In Veracruz and Puebla, with a predominance of orange orchards and Persian lime, the concentration was lower with 4X102 and 1X102 copies, respectively. The bacterial concentration of samples collected in the states with the greatest epidemic intensity were fitted to a modified version of the Weibull model using SAS PROC NLIN ® v.9.0. The burden of inoculum of CLAS in Dc on the bacterial concentration in plant showed a sigmoidal curve, with an average statistically similar loading rate of inoculum (p=0.05) between Colima and Michoacan, with b-1 = 13, 599.314 (r2 = 0.72) and b-1 = 14, 883.248 (r2 = 0.87), respectively. In other entities, due to the low percentage of positive samples in Dc, a clear trend between the relationships of inoculum-vector-plant was not observed so the model was not adjusted. At plot level, the spatial pattern of concentration in plant and bacterial vector was analyzed with geostatistical interpolation maps with Surfer ver.10®. In seven plots, the pattern associated with the vector showed a behavior related to the spatial pattern of concentration of CLAS in plant and with the technological management level. In Colima there was a greater burden of inoculum in the periphery (4X106 copies), and lower inside (2x106 copies) the orchard with low technological management. Conversely, a lower burden of inoculum in the periphery was recorded (9X104 copies) and higher in the center (1x105 copies) of orchard with high technological management, although generally lesser bacterial load was relative to low technology. In Michoacan and Veracruz, where CLAS is under an active process of dispersion, the pattern was characterized by exhibiting an increase of edge into the orchards with concentrations in Dc 3x105 and 2x102 copies, 1X105 and 1 X102 copies in the peripheries, and in the center, (average of two orchards results) respectively. In Puebla, Dc samples were negative so a spatial pattern was not formed. This is the first work that studies the relationship between inoculum burden from CLAS in plant and vector at the regional level, likewise, a proposed is made about a threshold of acquisition of CLAS by Dc in a range of 2,694 and 13,900 copies of the gene 16S DNAr in Mexican lemon plants.

Master thesis

Huanglongbing CLas Weibull Carga de inóculo D.citri. Burden inoculum Fitopatología Maestría CIENCIAS AGROPECUARIAS Y BIOTECNOLOGÍA CIENCIAS AGRARIAS HORTICULTURA FRUTICULTURA