Título

EFECTO DE LA BACTERIA DE LA NECROSIS HEPATOPANCREÁTICA SOBRE LA EXPRESIÓN DE GENES Y RESPUESTAS INMUNES DEL CAMARON BLANCO Litopenaeus vannamei

Autor

MARIA DOLORES FIGUEROA PIZANO

Colaborador

TERESA GOLLAS GALVAN (Director)

GLORIA MARTINA YEPIZ PLASCENCIA (Asesor de tesis)

Nivel de Acceso

Acceso Abierto

Resumen o descripción

"Cada seis días se tomaron muestras individuales de hepatopáncreas y de hemolinfa. De la hemolinfa se midió la cuenta total

de hemocitos (CTH), la actividad de α-2-Magroglobulina (A-2-M), de fenoloxidasa y la de fenoloxidasa total. Del hepatopáncreas y de los hemocitos se extrajo el RNA total, éste trató con DNasa I para eliminar el DNA genómico y se sintetizó cDNA. El análisis de expresión de genes se realizó mediante PCR en tiempo real, con 5 camarones por tratamiento y 3 repeticiones de cada uno. A partir del cDNA de hepatopáncreas se evaluó la expresión de los genes de la proteína de coagulación (CP) y de la proteína unidora de lipopolisacáridos y β-glucanos (LGBP), mientras que del cDNA de hemocitos se evaluó la expresión de los genes de A-2-M, profenoloxidasa (proPO) y trasnglutaminasa (TGasa). Además, en ambos tejidos se evaluó la expresión del gen de L8, para normalizar los datos. La expresión relativa temporal se calculó con el método 2 - ΔΔCt. De los 36 camarones que se infectaron con BNHP solamente 30 resultaron positivos. La CTH no mostró diferencias significativas en los camarones infectados con la BNHP en comparación con los sanos en ninguno de los 4 tiempos. La actividad específica de A-2-M disminuyó significativamente en los días 18 y 24 post-infección. En el caso de la actividad específica de fenoloxidasa y fenoloxidasa total se presentó una disminución significativa solamente en el día 18 post-infección. La expresión del gen de CP disminuyó a los 6 días post-infección, mientras que para el día 18 presenta un aumento de casi 2.5 veces. La expresión del gen de LGBP aumentó en los primeros 3 tiempos y para el día 24 post- infección tuvo una drástica disminución. El gen que codifica para A-2M no mostró cambios significativos. La expresión del gen de proPO aumentó más de 4 veces a los 12 días post-infección y a los 18 días post-infección disminuyó. El gen de TGasa aumentó su expresión hasta 3.5 veces en el día 12 postinfección. Los resultados encontrados en este estudio sugieren una participación activa del sistema profenoloxidasa y de la reacción de coagulación contra la infección de la BNHP, principalmente en los días 12 y 18 post-infección.

Palabras Clave: Bacteria de la Necrosis Hepatopancréatica (BNHP), Litopenaeus vannamei, Sistema Inmune, Sistema proPO, Coagulación y Expresión de Genes"

Fecha de publicación

enero de 2013

Tipo de publicación

Tesis de maestría

Versión de la publicación

Versión publicada

Formato

application/pdf

Idioma

Español

Audiencia

Público en general

Repositorio Orígen

Repositorio institucional del CIAD, A.C.

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