Título
Caracterizacion del peptido flo producido en microalgas y evaluacion de la actividad antimicrobiana y citotoxica en Nannochloropsis oculata
Autor
SARAI DAMARIS DAVALOS GUZMAN
Colaborador
RUTH ELENA SORIA GUERRA
Nivel de Acceso
Acceso Abierto
Resumen o descripción
Existe una creciente preocupación por la falta de tratamientos efectivos para
infecciones causadas por bacterias resistentes, ya que la resistencia microbiana está en
aumento a nivel mundial. Los PAM tienen múltiples mecanismos de acción que los
vuelven efectivos contra bacterias resistentes, lo que los convierte en una opción efectiva
contra infecciones causadas por estos microorganismos. El péptido antimicrobiano Flo,
derivado del árbol Moringa oleifera, ha sido ampliamente estudiado por su mecanismo
de acción contra bacterias. En este proyecto, se utilizaron las microalgas Scenedesmus
acutus, Nannochloropsis oculata y Chlorella vulgaris para producir el péptido Flo de
forma recombinante. Se demostró que la transformación genética de las microalgas con
el gen flo fue exitosa, y se identificaron líneas transplastómicas en las tres cepas.
La identificación y cuantificación del péptido Flo se realizó por ensayo de ELISA,
en N. oculata y S. acutus. Posteriormente fue posible identificar por Western blot el
péptido en N. oculata. Los ensayos antimicrobianos utilizando la proteína total soluble
(PTS) de la cepa transplastómica y silvestre de N. oculata, demostraron tener actividad
atribuible al péptido contra las cepas ATCC Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae y
Staphylococcus aureus, no se demostró actividad antimicrobiana para el caso de
Enteroccocus faecalis. Se analizó la actividad en cepas bacterianas resistentes a
antibióticos de uso clínico, donde se demostró la inhibición de Staphylococcus
epidermidis, E. faecalis y K. pneumoniae, mientras que para E. coli solo se observó
disminución del crecimiento bacteriano. La respuesta inflamatoria de la línea
transplastómica fue analizada por el ensayo de secreción de interleucina 6 (IL-6),
interleucina 10 (IL-10) y factor alfa de necrosis tumoral (TNF-α).
There is a growing concern about the lack of effective treatments for infections
caused by resistant bacteria, as microbial resistance is on the rise worldwide.
Antimicrobial peptides (AMPs) have multiple mechanisms of action that make them
effective against resistant bacteria, making them a viable option for combating infections
caused by these microorganisms. The antimicrobial peptide Flo, derived from the Moringa
oleifera tree, has been extensively studied for its mechanism of action against bacteria.
In this project, the microalgae Scenedesmus acutus, Nannochloropsis oculata, and
Chlorella vulgaris were used to produce recombinant Flo peptide. Successful genetic
transformation of the microalgae with the flo gene was demonstrated, and transplastomic
lines were identified in all three strains.
Identification and quantification of the Flo peptide were conducted using an ELISA assay,
in N. oculata and S. acutus, respectively. Subsequently, the peptide was identified in N.
oculata through Western blot analysis. Antimicrobial assays using the soluble total protein
(PTS) from the transplastomic and wild strains of N. oculata showed activity attributed to
the peptide against ATCC strains of Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, and
Staphylococcus aureus; however, no antimicrobial activity was demonstrated against
Enterococcus faecalis. The activity against clinically used antibiotic-resistant bacterial
strains was analyzed, revealing inhibition of Staphylococcus epidermidis, E. faecalis, and
K. pneumoniae, while only a reduction in bacterial growth was observed for E. coli. The
inflammatory response of the transplastomic line was analyzed using interleukin 6 (IL-6),
interleukin 10 (IL-10), and tumor necrosis factor-alpha (TNF-α).
Editor
Facultad de Ciencias Químicas
Fecha de publicación
1 de agosto de 2023
Tipo de publicación
Tesis de doctorado
Versión de la publicación
Versión publicada
Recurso de información
Formato
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Idioma
Español
Cobertura
México. San Luis Potosí. San Luis Potosí.
Repositorio Orígen
Repositorio Institucional NINIVE
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