Título
Detección de HER2 en células de carcinoma de mama dediante sustratos funcionalizados
Autor
ALEXANDRO TELLEZ PLANCARTE
Colaborador
PABLO GUSTAVO DAMIAN MATZUMURA (Asesor de tesis)
NIKOLA BATINA SKELEDZIJA (Asesor de tesis)
Nivel de Acceso
Acceso Abierto
Resumen o descripción
Los biosensores presentan un gran potencial para la detección de cáncer a través del uso de biomarcadores moleculares asociados a tumores. En este trabajo, se presenta la inmovilización del anticuerpo monoclonal anti-HER2 recombinante humanizado (trastuzumab) sobre una placa nanoestructurada de plata preparada por deposición de láser pulsado (PLD), sobre una película delgada de Au(111), por ser este el material que presentó mayor adherencia con las nanoestructuras de plata. La inmovilización se realizó a través de monocapas autoensambladas de ácido 4- mercaptobenzoico (4 MBA SAMs) que se activaron con los reactivos de acoplamiento (EDC/NHS). Una combinación de imágenes de inmunofluorescencia y análisis z-stack por Microscopía Confocal de Barrido Láser (CLSM) permitió detectar la presencia y distribución de HER2 en las membranas celulares de las diferentes líneas celulares analizadas. Cuatro líneas celulares de cáncer de mama que expresan HER2 en diferentes proporciones (SKBR3 +++, MCF-7 +/-, T47D +/-, MDA-MB-231 -) se incubaron durante 24 horas en placas nanoestructuradas de plata funcionalizada (FSNP) y también sobre películas planas de Au(111). Las células se fijaron por medio de un tren de deshidratación por etanol, luego se caracterizaron por Microscopía de Fuerza Atómica (AFM) y dispersión Raman mejorada por efecto de la superficie (SERS). Los resultados de SERS mostraron una tendencia similar que los hallazgos por CLSM (SKBR3> MCF-7> T47D> MDA-MB-231), especialmente cuando se monitoreó el pico Raman asociado con el aminoácido de fenilalanina a 1002 cm-1 . Debido a la alta selectividad y alta sensibilidad de SERS con una placa nanoestructurada de plata funcionalizada (FSNP), se propone este método para identificar la presencia de HER2 en células de cáncer de mama.
Es importante señalar que SERS es una técnica novedosa que podría complementar a las técnicas convencionales para la identificación de HER2.
Fecha de publicación
8 de enero de 2019
Tipo de publicación
Tesis de doctorado
Recurso de información
Idioma
Español
Repositorio Orígen
Repositorio Institucional de la Universidad Autónoma Metropolitana Unidad Iztapalapa
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