Extracción, cuantificación y valoración biológica del extracto de hoja de Larrea tridentata (sessé

&

moc. ex dc.) coville para su uso como agente biocida

SAMUEL LOPEZ AGUIRRE (2017)

Para evaluar el efecto biocida de extractos de hoja de L. tridentata para ser usado como desinfectante en instalaciones avícolas, primero se establecieron las condiciones de extracción para obtener el mejor rendimiento de fitoquímicos, para ello, se usaron tres disolventes y cuatro tiempos de incubación. Con los extractos obtenidos se realizaron pruebas in vitro para conocer las concentraciones mínimas inhibitorias y bactericidas sobre S. typhimurium. Los resultados mostraron que la extracción fue más eficiente a los 40 minutos de incubación usando agua por proceso de decocción, obteniendo hasta un 36.57% de material extractable, la concentración más baja con efecto inhibitorio sobre S. typhimurium fue de 0.2 gr mL-1 con un halo de inhibición de 10 mm, mientras que la concentración mínima bactericida fue de 0.3 gr mL-1 con un halo de inhibición de 13 mm con esta misma técnica de extracción. A este extracto, se le realizó una caracterización espectrofotométrica para identificar la presencia de ácido nordihidroguayarético, compuesto químico presente en mayor proporción al cual se le atribuyen diversas propiedades, así como otros compuestos. La espectrofotometría de masas, mostró la presencia del ácido nordihidroguayaretico y kaempferol entre otros compuestos no identificados. Posteriormente, se realizo un estudio de toxicidad administrando por vía oral a un grupo de ratas cepa Wistar dosis única y dosis repetidas del extracto acuoso, y se midieron parámetros bioquímicos, citoquinas y expresión genética de toxicidad. Las ratas tratadas con dosis única del extracto acuoso, no mostraron manifestaciones clínicas de toxicidad, mientras que las ratas que consumieron dosis repetidas durante cuatro semanas, mostraron una disminución en la concentración de enzimas hepáticas, así como en la expresión génica para TNF-a, IL-1β y IL-6 con respecto al grupo control, pero manteniendo los valores dentro de los parámetros normales de referencia, lo que indica que al menos bajo las condiciones experimentales, el extracto acuoso de hojas de L. tridentata no causa toxicidad en los animales que la consumieron. Finalmente, para determinar la efectividad del extracto como desinfectante en instalaciones avícolas, se realizó una prueba de campo en una granja comercial productora de pollo de engorda, comparando la cantidad de unidades formadoras de colonia detectadas en el techo, pared, piso y cortinas de la nave bajo tres escenarios: cuando no se desinfectaba, cuando se realizaba el proceso de lavado y desinfección de rutina y cuando se desinfectaba usando el extracto acuoso de hojas de L. tridentata. A las unidades formadoras de colonia aisladas en las instalaciones, se les realizaron pruebas bioquímicas diferenciales para corroborar la presencia de S. typhimurium. Los resultados muestran que cuando se usó el extracto acuoso de L. tridentata, como desinfectante en las instalaciones, la concentración de unidades formadoras de colonias de S. typhimurium disminuyeron hasta en dos órdenes comparado a la concentración encontrada cuando las instalaciones no se desinfectarón (1x107 a 1x105 UFC), por lo que se concluye que el uso del extracto acuoso de Larrea tridentata puede ser una alternativa natural, segura y eficiente como agente biocida para desinfectar instalaciones avícolas.

Tesis de doctorado

CIENCIAS FÍSICO MATEMÁTICAS Y CIENCIAS DE LA TIERRA