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Producción de taxoides en cultivos in vitro de callos y células elicitadas de Taxus globosa

HEBERT JAIR BARRALES CUREÑO (2013, [Tesis de doctorado])

Tesis (Doctorado en Ciencias, especialista en Botánica).- Colegio de Postgraduados, 2013.

Los objetivos de este trabajo fueron: establecer un método de propagación in vitro para callos y células en suspensión de Taxus globosa, se realizaron pruebas de viabilidad celular; se elicitaron suspensiones celulares con jasmonato de metilo, etanol y una combinación de peróxido de hidrógeno con butionina de sulfoximina. Se cuantificaron tres taxoides: taxol, cefalomanina y 10-diacetil baccatina por Cromatografía Liquida de Alta Resolución en cultivos in vitro de callos, células elicitadas y hojas de T. globosa. La inducción de los callos se originó a los 40 días, el mayor porcentaje se obtuvo con el tratamiento de picloram y polivinil pirrolidona. El análisis por Cromatografía Líquida de hojas de un extracto crudo en metanol registró la mayor acumulación de taxoides totales, mientras que en el extracto crudo de callos con metanol se observó una alta concentración de 10-diacetil baccatina. Los cultivos crecidos en medios de cultivo B5 con 13.4 µM de ácido naftalenacético y 6.72 µM de picloram, presentaron el mejor crecimiento y una coloración verde cristalina. La prueba de diacetato de fluoresceína reveló que muchas de las células fluorescen, indicando que los cultivos celulares se mantienen viables a lo largo del tiempo. Se observó el efecto de las hormonas a nivel microscópico sobre las células, en el medio de cultivo adicionado con ácido naftalenacético las células se mostraron alargadas y formando agregados, con ácido naftalenacético y bencil-aminopurina las células mostraron proliferación; con ácido naftalenacético y picloram, las células mostraron una elongación y separación celular. La máxima ganancia en peso seco se observó con los tratamientos de BSO y H2O2 en el octavo día después de la siembra. Con jasmonato de metilo se presentó el menor crecimiento en el octavo día. El pH de los cultivos celulares osciló en un rango de 5.2 a 6.2. Respecto al volumen de medio consumido, éste fue ascendente. En los experimentos de elicitación los resultados fueron: la mayor acumulación de taxoides se obtuvo en el tratamiento con peróxido de hidrógeno más butionina de sulfoximina, aumentando 81 % la producción de 10-diacetil baccatina en el sexto día, 2 % la cefalomanina en el octavo día y con una detección menor a 1% de taxol en el décimo día respecto al control. _______________ TAXOIDS PRODUCTION IN CROP OF CALLOS in vitro AND ELICITED CELLS OF Taxus globosa. ABSTRACT: The objectives of this study were: to establish a method of propagation in vitro in callus and cells, to perform HPTLC assays in callus, cell viability testing, to elicit cell suspensions with methyl jasmonate, ethanol and a combination of hydrogen peroxide with buthionine sulfoximine. Three taxoids were quantified: taxol, cephalomannine and 10-diacetyl baccatin using High Resolution Liquid Chromatography in callus in vitro cultures, elicited cells and leaves of T. globosa. The callus induction of T. globosa was originated after 40 days, the highest percentage was obtained with treatment of picloram and polyvinyl pyrrolidone. Liquid Chromatography analysis showed the greatest accumulation of taxoids in sheets from crude extract with methanol. HPLC analysis of the crude extract of callus with methanol had a high concentration of 10-diacetyl baccatin. FDA testing revealed that many of the cells fluoresced, indicating that the cell cultures remain viable throughout the time. It was observed that the effect of hormones on a microscopic level on cells in culture medium supplemented with naphthalene acetic acid the cells were long and forming groups. On treatment naphthalene acetic acid/benzyl-aminopurine showed cell proliferation; on treatment with the phytohormones naphthalene acetic acid/picloram showed cell elongation and cell separation. The maximum dry weight gain was observed with treatments of hydrogen peroxide plus buthionine sulfoximine on the eighth day after sowing. With methyl jasmonate elicitor, a slower growth was shown on the eighth day. pH units of the crops ranged from 5.2 to 6.2. In relation to the volume of spent medium, this consumption was ascending. In the experiments of elicitation the results were: accumulation of taxoids as obtained in the treatment with hydrogen peroxide plus buthionine sulfoximine, increasing 81% of the production of 10-diacetyl baccatin on the sixth day, 2% cephalomannine in the eighth day and with the lower detection of taxol in the tenth day related to control.

10-diacetil baccatina cefalomanina Taxol Anticáncer Fitohormonas Viabilidad celular 10-diacetyl baccatin Cephalomannine Phytohormones Cell viability Botánica Doctorado CIENCIAS AGROPECUARIAS Y BIOTECNOLOGÍA

Material de empaque para biofiltración con base en poliuretano modificado con almidón, metodos para la manufactura del mismo y sistema de biofiltración

Packing material comprising starch-modified polyurethane for the biofiltration of organic compounds present in gaseous or liquid effluents, production methods thereof and biofiltration system

OLGA BRIGIDA GUTIERREZ ACOSTA VLADIMIR ALONSO ESCOBAR BARRIOS SONIA LORENA ARRIAGA GARCIA (2011, [Patente])

"La presente invención describe un material de empaque para biofiltros que comprende un polímero de poliuretano y almidón. El material de empaque es resistente a la compactación, es capaz de sorber compuestos orgánicos contaminantes y reduce el tiempo de arranque del biofiltros. El material de empaque puede ser utilizado como soporte en la biofiltración de compuestos orgánicos volátiles y/o semi-volátiles presentes en efluentes gaseosos o líquidos."

"The invention relates to a packing material for biofilters, having a polyurethane polymer and starch. The packing material is resistant to compaction, can sorb pollutant organic compounds and reduces the start-up time of the biofilter. The packing material can be used as a substrate in the biofiltration of volatile and/or semi-volatile organic compounds present in gaseous or liquid effluents."

B01D53/34 B01J19/00 B01J20/26 B01J20/30 B29C67/20 C02F3/10 C12M1/00 B01D53/72 B01D53/85 B01J20/24 B01J20/262 B01J20/3064 C08J9/0061 C08J9/10 B01D2251/95 B01D2257/2064 B01D2257/7022 B01D2257/7027 B01D2257/704 B01D2257/708 B01D2258/06 C08J2203/04 C08J2375/04 C08J2403/02 CIENCIAS FÍSICO MATEMÁTICAS Y CIENCIAS DE LA TIERRA CIENCIAS DE LA TIERRA Y DEL ESPACIO

Repetitive controller for compensation of periodic signal

JESUS LEYVA RAMOS GERARDO ESCOBAR VALDERRAMA (2010, [Patente])

"A repetitive controller scheme with positive feedback and feedforward introduces infinitely many poles on the imaginary axis located at the resonant peaks. The feedforward introduces zeros, which produce notches located in between two consecutive resonant peaks. The latter has the advantage of making the controller more selective, in the sense that; the original overlapping (appearing at the valleys in a simple positive feedback repetitive controller) or interaction between consecutive resonant peaks is removed by the notches. This would allow, in principle, peaks of higher gains and slightly wider bandwidth, avoiding, at the same time, the excitation of harmonics located in between two consecutive peaks. The repetitive controller includes a simple Low Pass Filter (LPF).; This modification restricts the bandwidth of the controller and at the same time reinforces stability when the controller is inserted in the closed-loop system."

G06F17/10 G05B13/041 CIENCIAS FÍSICO MATEMÁTICAS Y CIENCIAS DE LA TIERRA

Expresión de interleucina -10 humana recombinante en Bifidobacterium longum y Escherichia coli

MARIA DE LOURDES REYES ESCOGIDO (2006, [Tesis de doctorado])

"Bifidobacterium longum es una bacteria Gram positiva no patógena que forma parte de un grupo de microorganismos conocidos como probióticos. Recientemente, el interés en esta bacteria ha aumentado considerablemente no solo por sus cualidades probióticas, ya que también se ha considerado como un sistema de producción de proteínas recombinantes y como vehículo para dirigir pro-fármacos hacia superficies tumorales. La bacteria Gram-negativa Escherichia coli, es el microorganismo más comúnmente empleado en la expresión de proteínas recombinantes a nivel industrial, sin embargo su sistema de secreción de proteínas hacia medio extracelular es más complejo y son pocas las proteínas que se exportan hasta el medio de cultivo. El objetivo de este trabajo fue el diseño y construcción de un plásmido estable y funcional en Bifidobacterium longum para la expresión de Interleucina-10 humana, proteína que se ha propuesto para el tratamiento de enfermedades de carácter inflamatorio. El gen IL-10 se optimizó en paralelo para su expresión en B. longum y en E. coli, y se fusionó al péptido señal BIF3 de la β galactosidasa de B. bifidum. El vector de expresión obtenido se denominó pLR y se utilizó para transformar células de B. longum y de E. coli. La presencia de hIL-10 en medio de cultivo y células se confirmó por Western blot y se cuantificó por ELISA. El vector pLR fue funcional en ambas cepas y el péptido BIF3 resultó eficiente para la secreción de hIL-10 en E. coli."

"Bifidobacterium longum is a Gram-positive, non-pathogenic bacteria considered as probiotic. In last years the importance of Bifidobacterium spp has grown for their probiotic properties and recently has been proposed as expression system for recombinant proteins and for delivery pro-drugs target to tumor surfaces as well. Escherichia coli, is a Gram-negative bacteria frequently used for recombinant protein expression. Nevertheless, the secretory system for proteins in Gramnegative bacteria is complex and there are only few proteins exported at extracellular medium. The main objective of this work was the design and construction of a stable and functional vector for Bifidobacterium longum for the expression of human interleukine-10, which is considered as therapeutic treatment of inflammatory diseases. The IL-10 gene was optimized for both, Bifidobacterium longum and Escherichia coli, and was fused to the signal peptide BIF3 from a β- galactosidase exported by Bifidobacterium bifidum. The novel expression vector was named pLR and was used to transform Bifidobacterium longum ATCC 15707 and Escherichia coli strains. hIL-10 was confirmed by Western blot and ELISA assays. pLR vector was functional in both strains and BIF3 led the secretion of hIL- 10 in Escherichia coli."

Péptido lider Interleucina-10 Probiótico BIOLOGÍA Y QUÍMICA CIENCIAS DE LA VIDA BIOLOGÍA MOLECULAR

Non-coordinated response of cytochrome P450-dependent geraniol 10-hydroxylase and NADPH: Cyt C (P-450) reductase in Catharanthus roseus hairy roots under different conditions

BLONDY BEATRIZ CANTO CANCHE VICTOR MANUEL LOYOLA VARGAS (2000, [Artículo])

To obtain basic information about the regulation of the enzyme geraniol 10-hydroxylase, the behavior of this enzyme and its redox partner –the NADPH: Cyt C (P450) reductase- was examined in C. roseus hairy roots subjected to various treatments. For several of these treatments, no concerted responses of either enzyme were observed, but in general, reductase was more responsive than G10H. The possible meaning of this finding is discussed.

CYTOCHROME P450 GERANIOL 10 HYDROXYLASE MONOOXYGENASE P450 REDUCTASE HAIRY ROOTS CATHARANTHUS ROSEUS BIOLOGÍA Y QUÍMICA BIOLOGÍA Y QUÍMICA

EXPRESIÓN Y PRODUCCIÓN DE IL-10 EN CÉLULAS MONONUCLEARES DE CERDO ESTIMULADAS CON PROBIÓTICOS CULTIVADOS CON PREBIÓTICOS

PABLO MARTINEZ LARA (2016, [Tesis de maestría])

Los probióticos inducen efectos benéficos en quien los consume, siendo uno de los más importantes la modulación de la respuesta inmune. En humanos, los géneros Bifidobacterium y Lactobacillus son los más representativos, que con ayuda de los prebióticos (oligosacáridos) mejoran su efecto en procesos inflamatorios. Se ha observado que en conjunto pueden estimular la producción

de IL-10 en células del sistema inmune como lo son las células mononucleares (CMN). El objetivo de la tesis fue evaluar la expresión del ARNm de IL-10 y la producción de la proteína en CMN de sangre periférica de cerdo estimuladas con los probióticos Lactobacillus reuteri 17938 (Biogaia) o Bifidobacterium animalis subsp. lactis Bb12 (Bb12) cultivados previamente en un medio sin y con inulina u oligofructosa con la finalidad de demostrar si los prebióticos inducen cambios en la producción de IL-10 sin interactuar directamente con las CMN. Se evaluó la concentración de IL-10 por ensayo de inmunoabsorción ligado a enzimas (ELISA) y la expresión de su transcrito ARNm mediante reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (RT-qPCR). Después de 24 h de estímulo con la cepa Bb12, las CMN aumentaron significativamente (p<0.05) la producción de IL-10, independientemente de la presencia de inulina

u oligofructosa previo al estímulo. Sin embargo, la mayor producción de IL-10 la indujo la cepa Biogaia cultivada en presencia de oligofructosa, en comparación a células sin tratamiento (SE). Se encontró un aumento significativo (p<0.05) en la expresión de ARNm de IL-10 de las CMN inducida por ambos probióticos previamente cultivados en presencia de glucosa e inulina, con respecto a la expresión cuando no hubo carbohidratos. En conclusión, la incubación de prebióticos no afectó la capacidad de Bb12 de producir IL-10 en CMN de sangre periférica de cerdo; pero sí influyó positivamente en la de Biogaia. Así, la producción de IL-10 por probióticos no solamente es cepa específica si no que depende de la presencia de los prebióticos en su desarrollo.

Probióticos, Prebióticos, CMN, IL-10, sistema inmune BIOLOGÍA Y QUÍMICA CIENCIAS DE LA VIDA INMUNOLOGÍA INMUNOLOGÍA

Desarrollo de una Herramienta para dar Soporte a la Extracción del Conocimiento Táctico en las Pymes de Desarrollo de Software

Uribe Devora, Guadalupe (2014, [Tesis de maestría])

Actualmente para implementar mejoras de procesos de software y/o adoptar un estándar o modelo de calidad las organizaciones de desarrollo de software, deben realizar una correcta gestión del conocimiento de los procesos que realizan para el

1.Conocimiento. 2.Extracción. 3.Administración. 4.Gestión. 5.Software. 6.Procesos. 7.Soporte. 8.Herramienta. 9.Pymes.10.Conocimiento Tácito. 11.Extracción del conocimiento.12.Gestión del conocimiento CIENCIAS FÍSICO MATEMÁTICAS Y CIENCIAS DE LA TIERRA