Título

Adenovirus humano tipo 5 modifica la fucosilación celular en un modelo in vitro de epitelio pulmonar humano

Autor

KATHYA GUTIERREZ HUANTE

Colaborador

IVAN MARTINEZ DUNCKER RAMIREZ

Nivel de Acceso

Acceso Abierto

Resumen o descripción

RESUMEN

Se ha reportado que la infección con CMV (citomegalovirus), HCV (virus de la hepatitis

C), HSV-1 (herpes virus simple- 1) y VZV (virus de varicela Zoster) incrementan la

expresión de antígenos fucosilados, incluyendo sLex (Siaa2-3Galb1-4(Fuca1-

3)GlcNAcb1-R) y Ley (Fuca1-2Galb1-4(Fuca1-3)GlcNAcb1-R), lo cual es mediado por la

sobreexpresión de distintas fucosiltransferasas (FUTs) celulares. La modificación del

glicocálix con estos antígenos, podría favorecer la diseminación de progenie viral y

alterar las distintas funciones biológicas asociadas a dichos antígenos.

El adenovirus humano tipo 5 (HAd5) es un conocido agente infeccioso y vector con

distintas aplicaciones biomédicas y biotecnológicas. No obstante que los adenovirus han

sido ampliamente estudiados desde que fueron aislados en 1953, no existían reportes

en la literatura que describieran algún efecto de la infección con HAd5 u otro adenovirus,

sobre la glicosilación de las células infectadas y por lo tanto se desconocía la

participación de la glicosilación celular en la patogénesis de esta infección. El objetivo

del presente trabajo fue determinar si la infección con HAd5 provoca cambios en el perfil

de glicosilación, particularmente la fucosilación y la sialilación, de la línea celular A549,

la cual fue utilizada como modelo de epitelio pulmonar, blanco natural de la infección con

HAd5. Los resultados obtenidos mediante marcaje metabólico y unión de lectinas

mostraron que la infección con HAd5 causa un incremento significativo en la fucosilación

de novo y particularmente del enlace Fuc a1-2. Esto se respaldó por datos adicionales

obtenidos por PCR tiempo real, que mostraron que la infección con HAd5 causa una

sobreexpresión de los genes que codifican para las a1-2 fucosiltransferasas FUT1 y

FUT2. Debido a que se ha reportado que otras infecciones virales causan un aumento

de la expresión del antígeno bi-fucosilado Ley, se procedió a determinar mediante

Western Blot si la infección con HAd5 modifica su expresión. Se mostró que la infección

causa una modificación heterogénea en la expresión de este antígeno, indicando su

participación potencial en el incremento de la proliferación celular e inhibición de

apoptosis asociadas a la infección con HAd5.

ABSTRACT

It has been reported that the infection with CMV, HCV, HSV-1 or VZV, through the

overexpression of host fucosyltransferases (FUT) increases the expression of

fucosylated antigens in the host cell, including sLex (Siaa2-3Galb1-4(Fuca1-3)GlcNAcb1-

R) and Ley (Fuca1-2Galb1-4(Fuca1-3)GlcNAcb1-R). The modifications of the glycocalyx

with these antigens could favor viral dissemination, but also modulate biological functions

associated to these antigens, including proliferation and apoptosis.

Human adenovirus type 5 (HAd5) is a known infectious agent and vector with different

biomedical and biotechnological applications. Although adenoviruses have been widely

studied since their first isolation in 1953, no reports are available regarding the effect of

these viruses on the glycosylation of the host cell or the potential implications of

glycosylation modulation in the pathogenesis of adenovirus infection.

The aim of this work was to determine whether HAd5 infection causes changes in the

glycosylation profile of human infected cells, particularly sialylation and fucosylation. We

used the A549 cell line as a model of respiratory epithelium, the natural target of Ad5.

The results obtained using metabolic labeling and lectin binding showed that HAd5

infection causes a significative increment in the de novo fucosylation, particularly of

Fuca1-2. This was further supported by the finding that HAd5 infection increases

expression of the genes coding for the a1-2 fucosyltransferases FUT1 and FUT2. In view

of these findings and also that other viral infections have been reported to cause an

increased expression of the bi-fucosylated antigen Ley, we proceeded to determine

through Western Blot whether HAd5 caused changes in the expression of this antigen in

infected A549 cells. It was shown that HAd5 infection causes a heterogeneous change in

Ley expression, pointing out to a potential role of this antigen in viral mechanisms that

favor proliferation and inhibit apoptosis.

Editor

El autor

Fecha de publicación

29 de mayo de 2019

Tipo de publicación

Tesis de doctorado

Formato

pdf

Idioma

Español

Cobertura

MEX

Audiencia

Investigadores

Repositorio Orígen

Repositorio Institucional de Acceso Abierto de la Universidad Autónoma del Estado de Morelos

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