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Sincronización de células de tabaco (Nicotiana tabacum) línea celular NT-1

León Francisco Ruiz Herrera (2007)

Instituto de Investigaciones Químico Biológicas. Maestría en Ciencias en Biología Experimental

The cell cycle is the period that elapses from one division to the next. Each Cell is the product of a cell cycle, which comprises the ordered sequence of the Events G1→G2→M (Figure 1.1), where a eukaryotic cell doubles its Chromosomes and divides into two cells. An overview of the cell cycle allows Observe how the cell passes through two major stages: cell division, or phase M, and The interface (comprising G1, S and G2 phases) (Buchanan et al., 2000, Morgan, 2007). The interface, which elapses between two cell divisions, is the most Of the cell cycle. During phase G1 (G gap) materials are synthesized as RNA and proteins; In the S phase or of synthesis the DNA replication takes place, besides Synthesize some proteins such as histones. After replication is complete, the cell Enters the phase G2 where compounds necessary for the division are synthesized and begins Gradual condensation of the chromatin, which is completed in the early stages of Mitosis giving rise to chromosomes visible under the microscope, showing its typical appearance Of two chromatids and four arms (Buchanan et al., 2000, Dashek and Harrison, 2006; Morgan, 2007). Phase M is the shortest period of the cell cycle, during which the Mitosis (or karyokinesis), ie nuclear division and cytokinesis, and the division of the Cell (which has previously duplicated its genetic and cytoplasmic material) in two Identical daughter cells.

El ciclo celular es el periodo que transcurre de una división a la siguiente. Cada célula es el producto de un ciclo celular, el cual comprende la secuencia ordenada de los eventos G1→G2→M (Figura 1.1), donde una célula eucarionte duplica sus cromosomas y se divide en dos células. Una visión global del ciclo celular permite observar cómo la célula transcurre por dos grandes etapas: la división celular, o fase M, y la interfase (que comprende las fases G1, S y G2 ) (Buchanan et al., 2000; Morgan, 2007). La interfase, tiempo que transcurre entre dos divisiones celulares, es el lapso más prolongado del ciclo celular. Durante la fase G1 (G de gap) se sintetizan materiales, como RNA y proteínas; en la fase S o de síntesis se produce la replicación del DNA, además se sintetizan algunas proteínas como las histonas. Una vez finalizada la replicación, la célula entra en la fase G2 donde se sintetizan compuestos necesarios para la división y se inicia la condensación gradual de la cromatina, que se completa en las primeras etapas de la mitosis dando lugar a cromosomas visibles al microscopio, mostrando su aspecto típico de dos cromátidas y cuatro brazos (Buchanan et al., 2000; Dashek and Harrison; 2006; Morgan, 2007). La fase M es el periodo más corto del ciclo celular, durante el cual tiene lugar la mitosis (o cariocinesis), es decir la división nuclear y la citocinesis, y la división de la célula (que previamente ha duplicado su material genético y citoplasmático) en dos células hijas idénticas.

Master thesis

CIENCIAS AGROPECUARIAS Y BIOTECNOLOGÍA IIQB-M-2007-0002 Células Tabaco DNA

Efecto de la desnutrición moderada y grave en la activación de proteínas que participan en la señalización del daño al ADN en linfocitos T y B de ratas de 21 días de edad

ANA MARIA GONZALEZ GUTIERREZ (2020)

La desnutrición calórico-proteica (DCP) ocurre cuando se consumen nutrientes insuficientes para satisfacer las necesidades biológicas de un organismo. Se ha documentado una relación entre la desnutrición y el daño al ADN, de donde las rupturas de doble cadena de ADN (DSBs) son las más peligrosas. El presente trabajo tuvo como objetivo analizar el efecto derivado de la desnutrición moderada y grave sobre las proteínas gH2AX, pATM, P53t+ y P53-pSer15+, que participan en la señalización del daño al ADN, en linfocitos T y B de ratas lactantes. Se utilizaron ratas de la cepa Wistar, y se indujo la desnutrición experimental por el método de competencia de alimento durante la lactancia al aumentar el número de crías por nodriza, trabajando con las que presentaron desnutrición moderada (DNM) y grave (DNG). Debido a su alta especificidad, el ensayo de la histona variante H2AX fosforilada asociada con pATM (Ser1981), seguido por el marcaje de P53 sin fosforilar (P53t+) y fosforilada (P53-pSer15+), combinado con citometría de flujo se utilizó en este trabajo para demostrar el impacto de la desnutrición en la respuesta al daño del ADN. Se observó que los linfocitos esplénicos T y B de ratas DNM y DNG tienen la capacidad de detectar daño al material genéticoal incrementarse el porcentaje de células pATM+; así mismo se observó un incremento en los linfocitos esplénicos T y B dobles positivos (pATM+/gH2AX+) en el grupo DNM. Las ratas con DNM y DNG mostraron un incremento en el porcentaje de linfocitos B gH2AX+ de bazo y sangre periférica. Mientras que, en las ratas DNG se observó un incremento en el porcentaje de linfocitos B esplénicos dobles positivos (P53t+/P53-pSer15+) y P53-pSer15+; lo que podría indicar que la ruta de señalización se encuentra alterada. Los hallazgos del presente estudio nos permiten sugerir que la DNG compromete la respuesta celular del daño al ADN.

Doctoral thesis

Daños del ADN Células T Desnutrición -- Investigación Experimentación con animales Biología experimental Células B BIOLOGÍA Y QUÍMICA

Electrodeposition of ZnO window layer for an all-atmospheric fabrication process of chalcogenide solar cell

JESUS SALVADOR JAIME FERRER (2015)

This paper presents the low cost electrodeposition of a transparent and conductive chlorine doped ZnO layer with performances comparable to that produced by standard vacuum processes. First, an in-depth study of the defect physics by ab-initio calculation shows that chlorine is one of the best candidates to dope the ZnO.

This result is experimentally confirmed by a complete optical analysis of the ZnO layer deposited in a chloride rich solution. We demonstrate that high doping levels (.1020 cm23) and mobilities (up to 20 cm2 V21 s21) can be reached by insertion of chlorine in the lattice. The process developed in this study has been applied on a CdS/Cu(In,Ga)(Se,S)2 p-n junction produced in a pilot line by a non vacuum process, to be tested as solar cell front contact deposition method. As a result efficiency of 14.3% has been reached opening the way of atmospheric production of Cu(In,Ga)(Se,S)2 solar cell.

Article

Células solares Calcogenuros BIOLOGÍA Y QUÍMICA CIENCIAS DE LA VIDA BIOLOGÍA CELULAR MORFOLOGÍA CELULAR MORFOLOGÍA CELULAR

Rapid thermal processing of CuInSe2 electroplated precursors for CuIn(S,Se)2-based thin film solar cells

JESUS SALVADOR JAIME FERRER (2018)

During the elaboration of standard CISEL™ cells, electroplated CuInSe2 precursors undergo a rapid thermal processing (RTP) in a sulfur-containing atmosphere to promote grain growth and enable sulfurization of the precursor. The aim of this work is to show how structural and morphological properties of the CuIn(S,Se)2-based solar cells can be modified with RTP parameters, namely temperature, heating rate, and sulfur addition. X-ray diffractograms show that the preferential (112) orientation of the electrodeposited CuInSe2 precursor is maintained after annealing but the coefficient of crystallographic texture can be modified with specific RTP parameters. It is also shown that the quantity of sulfur incorporated in the chalcopyrite lattice can be controlled and reaches almost pure CuInS2 according to the sulfur quantity used during the RTP. Another effect of the RTP annealing is to form a Mo(S,Se)2 layer which can lead to a quasi-ohmic contact between the molybdenum and the absorber. The properties of the Mo(S,Se)2 buffer layer are also studied according to the process parameters and an increase of the annealing temperature or of the sulfur concentration tends to increase the thickness of this layer.

Article

Células solares Calcopirita BIOLOGÍA Y QUÍMICA CIENCIAS DE LA VIDA BIOLOGÍA CELULAR MORFOLOGÍA CELULAR MORFOLOGÍA CELULAR

Comparación de dos técnicas de extracción de pulpa dental para la obtención de células troncales

HERNAN HUMBERTO PERAZA DORANTES (2018)

"En el área de la salud el objetivo ha sido desarrollar estrategias que regeneren tejidos y órganos lesionados, anómalos, muertos, degenerados o perdidos por diversas causas. Es por ello que la investigación de las células troncales muestra una amplia perspectiva hacia la aplicación clínica. Debido a la facilidad de acceso de la pulpa dental a partir de la cual se obtienen células troncales, se considera candidata ideal para la investigación en áreas médicas de ingeniería de tejidos. El objetivo de este trabajo consiste en comparar la técnica de corte transversal contra la longitudinal para la obtención de células troncales de la pulpa dental. Además se realizaron pruebas de clonogenicidad, multipotencia y citometría de flujo. Para ello la muestra se obtuvo de pacientes entre 12 y 18 años que acudieron a la Clínica de la Maestría de Odontología Infantil (CMOI) y Cirugía Bucal de la Facultad de Odontología de la Universidad Autónoma de Yucatán (FOUADY) durante el periodo agosto 2017 - junio 2018.

Este estudio fue experimental, longitudinal y prospectivo. El tamaño de la muestra fue intencionada, no probabilística. Se estudiaron 24 pulpas de premolares divididos en dos grupos: 1. Corte longitudinal 41.7% (n=10) y 2. Corte transversal 58.3% (n=14), de las cuales se comparó el rendimiento valorado mediante el peso pulpar (7.0 mg). No se encontró diferencia significativa entre los pesos obtenidos por cada técnica de corte (p=0.472); es decir, que el rendimiento (valorado mediante el peso pulpar) del corte transversal fue similar al del longitudinal. Se obtuvo proliferación celular a partir de las últimas 6 pulpas del grupo de corte transversal (42.9%) a las que se les realizaron pruebas de clonogenicidad, multipotencia y citometría de flujo para CD90-CD73 (0.14% ± 0.01%) y CD90-CD105 (0.08% ± 0.01%).

Con base en las pruebas realizadas a las 6 pulpas podemos considerar que la técnica de corte transversal pudiera ser la más viable para la obtención de células troncales. Sin embargo, se considera necesario realizar más pruebas en condiciones diferentes."

Master thesis

pulpa dental células troncales técnicas de extracción MEDICINA Y CIENCIAS DE LA SALUD

Efecto de la insulina en la activación de las cascadas PI3K-TOR y MAPK en cultivos de células de tabaco NT-1

Grisel Fierros Romero (2012)

Instituto de Investigaciones Químico Biológicas. Maestría en Ciencias en Biología Experimental

In metazoans, insulin regulates both blood glucose levels and growth, the latter through the activation of the PI3K-TOR and MAPK signaling pathways. However, although insulin is one of the classic hormones of animals, plants such as beans, corn, tobacco and Arabidopsis also respond to this hormone, stimulating development. In the present study in tobacco cell cultures (NT-1 cell line), this hormone increased proliferation in a manner dependent on the concentration of auxin 2,4-D through the PI3K-TOR and MAPK pathways, whose participation was checked with the inhibitors LY294002, rapamycin, UO126 and torin. Cultures supplemented with the usual concentrations of 2,4-D plus insulin showed an increase in the expression of CDKB and phosphorylation of ribosomal protein S6, which was inhibited with rapamycin and torin, thus involving the participation of the PI3K pathway. -TOR. On the other hand, it is proposed that insulin also activates the MAPK pathway, due to the inhibitory effect of UO126 on growth previously stimulated by insulin. In cultures lacking 2,4-D, the addition of auxin plus insulin again promoted proliferation and increased E2F expression, while at low concentrations of 2,4-D, the hormone stimulated gene expression CYCLINE B, CDKB, E2F and GST. Torin promoted the transient proliferation and genetic expression of CYCLINE B and E2F and changed the shape of elongated cells to round.

En metazoarios la insulina regula tanto los niveles de glucosa en sangre como el crecimiento, esto último a través de la activación de las rutas de señalización PI3K-TOR y MAPK. No obstante, aunque la insulina es una de las hormonas clásicas de animales, plantas como frijol, maíz, tabaco y Arabidopsis también responden a esta hormona, estimulando el desarrollo. En el presente estudio en cultivos celulares de tabaco (línea celular NT-1), dicha hormona incrementó la proliferación de forma dependiente de la concentración de la auxina 2,4-D a través de las vías PI3K-TOR y MAPK, cuya participación se comprobó con los inhibidores LY294002, rapamicina, UO126 y torin. Los cultivos suplementados con las concentraciones habituales de 2,4-D más insulina presentaron un incremento en la expresión de CDKB y de la fosforilación de la proteína ribosomal S6, la cual se inhibió con rapamicina y torin, implicando así la participación de la vía PI3K-TOR. Por otra parte, se propone que la insulina también activa la vía MAPK, debido al efecto inhibitorio de UO126 sobre el crecimiento previamente estimulado por insulina. En cultivos carentes de 2,4-D, la adición de nuevo de auxina más insulina promovió la proliferación y el incremento de la expresión de E2F, mientras que en bajas concentraciones de 2,4-D, la hormona estimuló la expresión de los genes CICLINA B, CDKB, E2F y GST. Torin promovió la proliferación transitoria y la expresión genética de CICLINA B y E2F y cambió la forma de las células alargadas a redondas.

Master thesis

CIENCIAS AGROPECUARIAS Y BIOTECNOLOGÍA IIQB-M-2012-0003 Células NT-1 Extracción de RNA Cultivos celulares